рекомбинант днк олиш, генлар библиотекасини яратиш ва индиви дуал генларни ажраташ технологияси

DOC 48,5 КБ Бесплатная загрузка

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇

1363186006_42117.doc рекомбинант днк олиш, генлар библиотекасини яратиш ва индиви www.arxiv.uz режа: 1 рекомбииант днк олиш усуллари 2 вектор молекулалар, генлар библиотекасини яратиш ва индивидуал генларни ажратиш технологияси. 3 хулоса 1.ген мухандислигининг пойдевори-рекомбинант днклар технологияси генетик струтураларини бирга қўшиш техникаси молекуляр биологияникг энг муҳим ютуқлари дандир бу технологиядан фойдалаииб зарур маҳсулотни (оқсилни) кодирлайдиган днк молекуласининг кичик бир қисми генни кесиб олиш, унинг ёт ген билан комбинациясини яратиш, сўнгра бу янги геномни муносиб ҳужайраларга киритиб хўжайин ҳужайра днксининг синтез механнзми ёрдамида кўп марталаб кўпайтириш мумкин. супъий шароитда рекомбинант днк олиш ва генларни клонлаш илк бор 1972 йилда ақш олимлари бойер ва коэн томонидан амалга ошмрилгаи, бу олимлар е.соli бактериясининг хромосома днксига ва шу бактерия плазмидасига алоҳида идишларда есоri рестриктаза ферменти билан ишлов берганлар. плазмида таркибида фақат 1 дона есоri рестриктаза ферменти таниб кесадиган махсус нуклеотидлар изчиллиги бўлганлиги сабабли фермент плазмиданинг ҳалқасимон днк кўш занжирини фақат бир жойидан кесиб, плазмидани "ёпишқоқ" учли очиқ …

ектор усулида рекомбинацияда иштирок этувчи днк бўдагининг 3' учига дезоксинуклеотидилтрансфераза ферменти ёрдамида маълум узунликдаги олиго (da) - сегменти уланади. иккинчи учига эса олиго ((dт) - сегменти уланади. бу днк бўлаклари аралаштирилгаида dа ва dt сетментларнинг водород боғлари асосида ком-плементар бирикиши туфайли халқасимон днк структураси ҳосил бўладп. ҳосил бўлган днк даги бир занжирли бўш жойлар днк-полимераза1 ферменти ёрдамида, тўлдирилади. рестриктаза-лигаза усули энг содда ва осон рекомбинант днк олиш усули ҳисобланади. бу усулда днк молекуласи ва вектор плазмида "ёпишқоқ" учлар ҳосил килувчи рестриктаза билан қирқилади ва аралаштирилган ҳолда маълум шароитда реассоциация қилинади. комплементарлик хусусиятига кўра днк молекулалари ўзаро водород боғлари ёрдамида бирикиб халқасимон структура ҳогил қилади ва днк занжирининг бирикмаган жойлари днк-лигаза ферменти ёрдамида уланади. линкер молекулаларидан фойдаланиш усулида днк молекуласига ва вектор плазмидага т4 фаг днк-лигаза ферменти ёрдамида махсус нуклеотид кетма-кетлигига эга бўлган линкер молекула уланади. олинган икки турдаги днк молекуласи рестриктаза ферменти ёрдамида қирқилиб аралаштирилган ҳолда реассоциация қилинади. днк ва …

библиотекасини тузиш қуйидагича амалга оширилади: днк ва вектор молекулалар рестриктаза ферменти ёрдамида қирқилади ва маълум шароитда реассоциация қилинади. нуклеотидлар орасида уланмай қолган бўшлиқ днк-лигаза ферменти ёрдамида ўзаро бириктирилади. олинган рекомбинант днк бактерия ҳужайрасига трангформация қилинади. хромосомал днқда мавжуд генларни тўла клонлаш учун днк ўлчамига ва олинган клонларни сонига эътибор бериш керак. бу кўрсатгич қуйидаги формула ёрдамида хисоблапади, 1п (1-) 1п (1-х/у) бунда: х-клонланаётган днк ўлчами), у-гаплоид геномнинг ўлчзми ва р=0,99 га тенг булса 99 га тенг хромосомал днкнинг уникал қисми клонланади. генларни клонлашда кўпинча кднк библиотекасини тузиш мақсадга мувофиқдир. бу ҳолда махсус поли (y) ва олиго (dt) колонкалари ёрдамида учларида поли (а) нуклеотидлар кетма-кетлигини сақловчи ирнк трнк ва ррнк дан ажратиб олинади. олинган ирнк молекуласи олиго (dt) нуклеотидлари билан аралаштирилиб реассоциация қилинади. бунда ирнк молекуласининг поли (а) учида da ва dt қўш занжирли сегмент ҳосил бўлади. ушбу икки занжирли сегментнинг олиго (dt) учи кднк синтезини амалга оширувчи ревертаза ферменти учун …

идагича амалга оширилади рекомбимант плазмида денатурация қилинади (100° с ҳароратда 5мин., 0,2н наон эритмасида 15 мин), бир занжирли днк молекуласи стабил қўзғалмайдиган ҳолатда туриши учун нитроцеллюлоза фильтрига бириктирилади. олинган фильтр [? 32р] атф нуклеотиди билан нишонланган ирнк молекуласи билан гибридизация :қилинади. молекуляр гибридизация жараёнида фильтрга бириккан рекомбинант днк молекуласига комплементарлик қонунияти асосида нишонланган ирнк молекулалари бирикади. ҳосил бўлган гибрид днк молекуласи денатурация қилиниб нишонланган ирнк молекуласи (элюция ёрдамида) ажратиб олинади. олинган ирнк молекуласи ҳужайрасиз оқсил синтез қилиш тизимида текшириб кўрилади. ҳосил бўлган оқсил молекуласининг идентификация қилиш йўли билан индивидуал генларни ажратиб олишга омалга оширилади. хулосалар. хулоса қилиб айтадиган бўлсак. ген мухандислиги услублари билан аниқ режа асосида микроорганизмлар, ўсимликлар, ҳайвонларнинг янги шаклларини юзага келтирувчи генларини конструкция қилиш мумкин экан. генлар библиотекасини яратиш хўжалик аҳамиятига эга бўлган геиларни ажратиш, улардан индивидуал генларни олиш ва вектор молекуляр таркибига трансформация қилиши учун зарурдир.

рекомбинант днк олиш, генлар библиотекасини яратиш ва индиви дуал генларни ажраташ технологияси - Page 5

Хотите читать дальше?

Скачайте полный файл бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "рекомбинант днк олиш, генлар библиотекасини яратиш ва индиви дуал генларни ажраташ технологияси"

1363186006_42117.doc рекомбинант днк олиш, генлар библиотекасини яратиш ва индиви www.arxiv.uz режа: 1 рекомбииант днк олиш усуллари 2 вектор молекулалар, генлар библиотекасини яратиш ва индивидуал генларни ажратиш технологияси. 3 хулоса 1.ген мухандислигининг пойдевори-рекомбинант днклар технологияси генетик струтураларини бирга қўшиш техникаси молекуляр биологияникг энг муҳим ютуқлари дандир бу технологиядан фойдалаииб зарур маҳсулотни (оқсилни) кодирлайдиган днк молекуласининг кичик бир қисми генни кесиб олиш, унинг ёт ген билан комбинациясини яратиш, сўнгра бу янги геномни муносиб ҳужайраларга киритиб хўжайин ҳужайра днксининг синтез механнзми ёрдамида кўп марталаб кўпайтириш мумкин. супъий шароитда рекомбинант днк олиш ва генларни клонлаш илк бор 1972 йилда ақш олимлари бойер ва коэн ...

Формат DOC, 48,5 КБ. Чтобы скачать "рекомбинант днк олиш, генлар библиотекасини яратиш ва индиви дуал генларни ажраташ технологияси", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: рекомбинант днк олиш, генлар би… DOC Бесплатная загрузка Telegram