ферментларни олиш. фосфолипаза d ферментини олиш жараёнлари

DOC 52.5 KB Free download

Page preview (5 pages)

Scroll down 👇

1403618753_46139.doc ферментларни олиш. фосфолипаза d ферментини олиш жараёнлари режа: 1. фосфолипаза d ферменти 2. фосфолипаза учрайдиган объектлар 3. ўрта осиё шолғомидан фосфолипаза d ферментини ажратиб олиш а) эритмаларни тайёрлаш б) хом ашё тайёрлаш в) ишнинг бориши 4. фосфолипаза d ферменти олиш технологик схемаси 5. фосфолипаза d ферменти фаоллигини аниқлаш ҳозирги кунда – илмий ва ишлаб чиқариш мақсадларида маълум структурага эга бўлган фосфолипидлар жуда муҳимдир. бу муаммони шу лолекулани липолитик ферментлар ёрдамида липолитик синтез қилиш йўли билан хал қилиш мумкин. фосфолипидларнинг гидролизи то фосфотидил кислота ва асосгача бўлган реакцияни катализлайдиган ва субстратни поляр қисмида локаллашган фермент биринчи марта 1974 йилда аниқланган. сабзи илдиз меваси ва карам баргларидан тайёрланган экстрактда тухумли лецитинни гидролизи натижасида холинни ажратиш хусусиятига эга бўлган «лецитиназа» бориши тажрибаларда кўрсатиб берилган. 1-расм фосфотидил холин бундан кейинги кўп текширишларда бу фермент ўсимлик объектларида кўп тарқалганлиги ва айниқса у жудда ҳам кўп миқдорда ўрта осиё шолғомининг илдиз мевасида, сабзида, карам баргларида, …

низмларда кенг тарқалган. аввало бу фермент ўсимликлардаги суюлтирилган формаси мембранали фосфолипаза d нинг сомобилизирланган формасидир. микроорганизмларда бу ферментнинг 2 формаси – мембрана боғловчи ва секретлайдиган формаси мавжуд. секретлайдиган формаси ўз хоссалари бўйича ўсимлик ва ҳайвонот объектларидаги фосфолипаза d ферменти хоссаларида фарқланади. ўрта осиё шолғомидаги фосфолипаза d ферментини ажратиш, экстракциялаш учун эритмаларни тайёрлаш реактивлар ишнинг бориши. ўрта осиё шолғомидаги фосфолипаза d ферментини экстракциялаш учун 0,05 м бура эритмаси ва 0,2 м бор кислота эритмасидан ташкил топган боратли буфер тайёрлашимиз керак. 1 литр боратли буфер тайёрлаш учун: 350 мл 0,05 м nab4o7 x 10 h2o эритмаси ва 650 мл 0,2 м h3bo3 эритмаси керак бўлади. тайёр боратли буферни рн ни бор кислота ёрдамидп (h3bo3) 8,2 гача етказилади. фосфолипаза d ажратиб олиш учун хом ашё тайёрлаш реактивлар: 10% анжомлар: қиргич (майдалагич), гомогенизатор экстракт учун иссиққ чидамли идиш. ашёлар: ўрта осиё шолғоми. технологик схема. хомашё → гомогенизация → тиндириш → фильтрлаш → экстракт → …

укуни қуритилади ва катта бўлмаган ҳажмдаги совутилган бидистилланган сувда эритилади. 18000 айланишли аппаратда 0 0с да 10 минут давомида центрифугаланади. чўкма устидаги суюқлик лиофил қуритилади. ферментни қуруқ кукуни минусли ҳароратда сақланади. оқсил миқдори лоури усули билан аниқланади. этаноламин ҳосил бўлиши бўйича фосфолипаза d фаоллигини аниқлаш фосфолипаза d (фосфадилхолин-фосфат дегидрогеназа) фосфоглицеридлардаги ва сорингомиелинлардаги фосфат гуру4ҳларидаги ва гидрофил спиртлар орасидаги эфир боғларни гидрозизини катализлайди. сўнгги йиллардаги изланишлар фосфолипаза d ферменти худи бошқа липолитик ферментлар каби барча тирик организмлардаги липидлар алмашинувида ионларни ва турли метаболитларни биомембрана орқали ташилишини бошқарувчи жараёнларда жуда муҳим вазифани бажарилишини асослаб берди. фосфолипаза d ферментини биологик вазифасини ўрганиш ишлари ривожланиш босқичидадир. усул принципи фосфолипидларни аниқлаш (кефалин ёки лецитин) гидролитик парчаланиши натижасида ҳосил бўлган маҳсулотларни (этаноламин ёки холин) миқдорини ўлчашга асосланган. ферментни юқори активлиги 1 мг оқсил (мл.моль холин/мг.б.мин.) га нисбатан 1 минут давомида реакцияда ажралган, холин ёки этаноламин микромолекулаларида аниқланади. реактивлар: 1. 0,1 м na – ацетатли буфер рн …

сифатида эиэтилэфир ишлатилса инкубациялаш ҳарорати 27 0с, ддс ва силикагель ишлатилса инкубациялаш 30 0с бўлиши керак. диэтилэфир ва ддс ўлчамидаги инкубациялаш вақти 1 минут силикагель билан 30 минутга тенг. реакцион аралашмага 2,5 мл хлороформ қўшиш билан реакция тўхтатилади. аралашма интенсив чайқатилгандан сўнг 5000 айл/мин га тенг бўлган аппаратда сув қатлами олиб ташланади ва хлороформ изларини йўқотиш учун аралашма 50 0с да 10 минут қиздирилади. этаноламинни аниқлаш учун 1 мл сув қатламига рн=5,6 гва тенг бўлган 0,5 мл ацетатли буфер ва 1,2 мл метилцеллозолььнинггидрин қўшилади ва музли ҳаммомда совутилади. аралашма ҳажми 60% ли этанол эритмаси ёрдамида 5 мл га етказилади. эритманинг оптик зичлиги 570 нм да ўлчанади. этаноламин бўйича қурилган эгри чизиқ намунадаги этаноламинни мл молини оқсилни мг млга нисбати билан аниқланади ва қуйидаги формулалар ёрдамида ҳисобланади: эа . 2,5 эа . 0,041 а = ----------- = -------------- 61 . п . т п . т эа – 1 мл реакцион …

ферментларни олиш. фосфолипаза d ферментини олиш жараёнлари - Page 5

Want to read more?

Download the full file for free via Telegram.

Download full file

About "ферментларни олиш. фосфолипаза d ферментини олиш жараёнлари"

1403618753_46139.doc ферментларни олиш. фосфолипаза d ферментини олиш жараёнлари режа: 1. фосфолипаза d ферменти 2. фосфолипаза учрайдиган объектлар 3. ўрта осиё шолғомидан фосфолипаза d ферментини ажратиб олиш а) эритмаларни тайёрлаш б) хом ашё тайёрлаш в) ишнинг бориши 4. фосфолипаза d ферменти олиш технологик схемаси 5. фосфолипаза d ферменти фаоллигини аниқлаш ҳозирги кунда – илмий ва ишлаб чиқариш мақсадларида маълум структурага эга бўлган фосфолипидлар жуда муҳимдир. бу муаммони шу лолекулани липолитик ферментлар ёрдамида липолитик синтез қилиш йўли билан хал қилиш мумкин. фосфолипидларнинг гидролизи то фосфотидил кислота ва асосгача бўлган реакцияни катализлайдиган ва субстратни поляр қисмида локаллашган фермент биринчи марта 1974 йилда аниқланган. сабзи илдиз меваси ва карам баргла...

DOC format, 52.5 KB. To download "ферментларни олиш. фосфолипаза d ферментини олиш жараёнлари", click the Telegram button on the left.

Tags: ферментларни олиш. фосфолипаза … DOC Free download Telegram