taqsimlovchi xromotagrafiya

PPTX 21 sahifa 1,2 MB Bepul yuklash

Sahifa ko'rinishi (5 sahifa)

Pastga aylantiring 👇
1 / 21
powerpoint presentation taqsimlovchi xromotagrafiya jahongir akramjonov 1. affinit xromatografiyasida muvaffaqiyatga erishish uchun maslahatlar 2. affinit xromatografiyasi: asosiy tushunchalar va tamoyillar 3. affinit xromatografiyasining turlari va qo'llanilishi reja: bog'lanish bosqichi samarali bog'lanish ko'pincha matritsaga bog'langan ligand sig'imiga bog'liq, bu 1 ml gelfi uchun mikrogrammlarda (µg) yoki milligrammlarda (mg) ifodalanadi, yuqori sig'im esa ko'proq molekulalarning ushlanishini ta'minlaydi. bog'lanish bosqichida nishon molekula va o'ziga xos ligand o'rtasida o'zaro ta'sir yuzaga keladi, bu molekulani matritsada immobilizatsiyalangan ligandga selektiv ravishda bog'laydi, bu jarayon muvozanatga erishguncha davom etadi. affinitet xromatografiyasining asoslari affinitet xromatografiyasi biologik molekulalarni ajratish uchun o'ziga xos bog'lanish xususiyatlaridan foydalanadi, masalan, ferment va substrat o'rtasidagi bog'lanish, 10^4 dan 10^8 m-1 gacha bo'lgan affinlik konstantalari orqali o'lchanadi. odatda, ligandlar matritsaga kovalent bog'lanadi, bu esa 6-10 uglerodli masofani saqlaydi, chunki bu molekula maqsadli oqsil bilan o'zaro ta'sir qila olishini ta'minlaydi va 90% gacha tozalikka erishishi mumkin. matritsalar va tayanchlar tayanchning kimyoviy turg'unligi muhimdir, chunki u 2 …
2 / 21
fini o'z ichiga oladi. affinitet xromatografiyasining afzalliklari affinitet xromatografiyasi bir qadamda 90-99% gacha boʻlgan tozalik darajasiga erishish imkonini beradi, bu esa keyingi tozalash bosqichlariga boʻlgan ehtiyojni kamaytiradi. affinitet xromatografiyasi oqsillar, fermentlar, antitelalar va nuklein kislotalar kabi turli biomolekulalar uchun mos keladi, bu uning qo'llanilish doirasini kengaytiradi. ilovalar: fermentlarni tozalash affinit xromatografiyasi fermentlarni tozalashda yuqori selektivlikni ta'minlaydi, bunda ferment ligandga bo'lgan o'ziga xos bog'lanishidan foydalaniladi, bu esa 90% gacha tozalik darajasiga erishishga imkon beradi. fermentlarni affinit xromatografiyasi bilan tozalashda ferment substrat analogi yoki inhibitori matritsaga biriktiriladi; ushbu ligand ferment bilan kuchli bog'lanib, 10^-6 m dan 10^-9 m gacha bog'lanish konstantalarini hosil qiladi. xulosa affinit xromatografiyasi bio-o'zaro ta'sirlarga asoslangan bo'lib, 10^3 dan 10^8 m^-1 gacha bo'lgan bog'lanish konstantalarini qo'llaydi hamda farmatsevtika sanoatida keng qo'llaniladi. xulosa qilib aytganda, affinit xromatografiya 1950-yillarda rivojlangan va yuqori tozalik darajasiga erishish uchun antitelolar, fermentlar va nuklein kislotalar bilan ishlaydi. optimallashtirish strategiyalari ligand zichligini optimallashtirish, bog'lanish qobiliyatini maksimal …
3 / 21
jralib chiqishini oldini oladi va fermentlar kabi 20-50 nm o'lchamdagi biomolekulalarni immobilizatsiya qilish uchun foydalidir. yuvish bosqichi agar noo'rin bog'lanish sodir bo'lsa, yuvish bosqichiga 0,1 dan 0,5 m gacha bo'lgan natriy xlorid kabi tuz eritmasini qo'shish, elektrostatik o'zaro ta'sirlarni buzishga yordam beradi. yuvish eritmasining optimal ph darajasi 7.0 dan 8.0 gacha bo'lishi kerak, shuningdek, u matriksga xalaqit bermaydigan va maqsadli birikmani bog'lab turadigan past ion kuchiga ega bo'lishi kerak. elusiya bosqichi ion almashinuvchi affin xromatografiyasida elusiya yuqori ionli eritma (masalan, 0.5-1 m nacl) yordamida amalga oshiriladi, bu bog'langan moddalarni siqib chiqaradi. maxsus raqobatbardosh ligandlarni (10-100 mm) ishlatish, elusiya bosqichida analitning affinlik matritsasiga bog'lanishi uchun matritsaga kiritilib, ajratishga erishiladi. ilovalar: antitanalarni tozalash elütatsiya bosqichi ph 2.5-3.0 atrofida bo'lgan nordon buferlar yordamida amalga oshiriladi, bu esa antitananing oqsil-ligand kompleksidan ajralib chiqishiga olib keladi va 95% dan ortiq poklikka erishiladi. immunoglobulinlarni ajratib olishda a yoki g oqsili bilan qoplangan qatronlar qo'llaniladi, chunki ular …
4 / 21
aglari bo'lgan oqsillar nikel bilan bog'langan ustunlarda 1-bosqichda tozalanishi mumkin. affinitet ligandlari immunoglobulin g (igg) uchun oqsil a ligandlaridan foydalanish immunoassaylarda keng tarqalgan bo'lib, antitelolarni mustahkam bog'laydi va antitelolarni 90% dan ortiq aniqlikda tozalashga yordam beradi. nad+ va nadh kabi koenzimlar fermentlarni tozalash uchun affinitet ligandlari sifatida ishlatilishi mumkin, chunki ko'plab fermentlar bu koenzimlar bilan o'zaro ta'sir qiladi, bunda 75% dan 95% gacha bog'lanish samaradorligi kuzatiladi. affinitet xromatografiyasining turlari immobilizatsiyalangan metall ionli affinitet xromatografiyasi (imac) gistidin qoldiqlariga boy oqsillarni, masalan, 6x-his-tagged oqsillarni tozalash uchun ni2+, co2+ yoki cu2+ ionlaridan foydalanadi. affinitet matritsasining tabiatiga ko'ra, antitelalar (immunaffinitet), lektinlar (lektin-affinitet), nuklein kislotalar (dnk-affinitet) yoki metall ionlari (metal-xelat affiniteti) ishlatilishi mumkin. muammolarni bartaraf etish agar bog'lanish juda kuchli bo'lsa, elyusiya qiyin bo'lishi mumkin; ion kuchi, ph yoki raqobatdosh bog'lovchilarni asta-sekin o'zgartirish orqali elyuatsiyani optimallashtiring. 10 mm dan 100 mm gacha bo'lgan tuz konsentratsiyasini sinab ko'ring. noto'g'ri bog'lanishni kamaytirish uchun blokirovka qiluvchi vositalardan, masalan, …
5 / 21
taqsimlovchi xromotagrafiya - Page 5

Ko'proq o'qimoqchimisiz?

Barcha 21 sahifani Telegram orqali bepul yuklab oling.

To'liq faylni yuklab olish

"taqsimlovchi xromotagrafiya" haqida

powerpoint presentation taqsimlovchi xromotagrafiya jahongir akramjonov 1. affinit xromatografiyasida muvaffaqiyatga erishish uchun maslahatlar 2. affinit xromatografiyasi: asosiy tushunchalar va tamoyillar 3. affinit xromatografiyasining turlari va qo'llanilishi reja: bog'lanish bosqichi samarali bog'lanish ko'pincha matritsaga bog'langan ligand sig'imiga bog'liq, bu 1 ml gelfi uchun mikrogrammlarda (µg) yoki milligrammlarda (mg) ifodalanadi, yuqori sig'im esa ko'proq molekulalarning ushlanishini ta'minlaydi. bog'lanish bosqichida nishon molekula va o'ziga xos ligand o'rtasida o'zaro ta'sir yuzaga keladi, bu molekulani matritsada immobilizatsiyalangan ligandga selektiv ravishda bog'laydi, bu jarayon muvozanatga erishguncha davom etadi. affinitet xromatografiyasining asoslari affinitet xro...

Bu fayl PPTX formatida 21 sahifadan iborat (1,2 MB). "taqsimlovchi xromotagrafiya"ni yuklab olish uchun chap tomondagi Telegram tugmasini bosing.

Teglar: taqsimlovchi xromotagrafiya PPTX 21 sahifa Bepul yuklash Telegram