polimeraza zanjirireaktsiyasi (pcr)

PPTX 21 sahifa 2,4 MB Bepul yuklash

21 sahifa

FaylHub.uz

Telegram orqali yuklab olish

Hajm 2,4 MB

Fayl turi PPTX

Sahifalar 21

Yangilangan Dek 2025

Sahifa ko'rinishi (5 sahifa)

Pastga aylantiring 👇

1 / 21

пцр в реальном времени r e j a kirish pcrning kashf etilishi tarixi pcr tamoyili va mexanizmlari pcr komponentlari pcr testining bosqichlari pcr ning afzalliklari polimeraza zanjiri reaktsiyasi zanjir reaktsiya , pcr) - bu in vitro o'rganilayotgan biologik namunadagi ma'lum bir dnk fragmentining (rnk) nusxa ko'chirish sonini ahamiyatsiz miqdordan aniqlanadigan qiymatlarga sezilarli darajada oshirishga imkon beradigan usul . natijada, reaktsiya aralashmasidagi signal kuchayadi, bu patogen genomning ma'lum bir hududini aniqlash va aniqlash imkonini beradi. bu usul sekin o'sadigan, etishtirish qiyin bo'lgan yoki etishtirish mumkin bo'lmagan mikroorganizmlar ko'rsatilganda, shuningdek, serologik va boshqa diagnostika usullarining ma'lumotlari past bo'lgan hollarda hal qiluvchi ahamiyatga ega. amalga oshirishning soddaligi, yuqori sezuvchanlik va o'ziga xoslik bu usulni butun dunyoda mashhur qildi. pcr tufayli o'rganilayotgan materialning u yoki bu turida yuqumli agentlarning juda oz miqdordagi nuklein kislotalarini bevosita aniqlash mumkin bo'ldi. 1988 yilda bu usul birinchi marta dnk barmoq izlari texnologiyasidan foydalangan holda otalikni aniqlash uchun ishlatilgan. …

2 / 21

970-yillar boshida nobel mukofoti laureati x.korananing laboratoriyasidan norvegiyalik olim x.kleppe 80-90 °c gacha qizdirish orqali ikkala zanjirni ajratib, yangi hosil boʻlgan dnk segmentlarini ikki barobarga oshirish usulini taklif qildi. pcrning kashf etilishi tarixi keri b. mullis (1944–2019) 1971 yilda ushbu texnikani tavsiflovchi birinchi nashrda kleppe va boshqalar shunday yozgan: " dnk dupleksi ( ya'ni dnkning qo'sh zanjiri ) bitta zanjir hosil qilish uchun denatüratsiya qilinishi kerak. ushbu bosqich ikkita mos primerning etarlicha katta ortiqcha mavjudligida amalga oshiriladi. sovutgandan so'ng, har biri astar bilan mos ravishda murakkablashtirilgan shablon zanjirining butun uzunligini o'z ichiga olgan ikkita strukturani olishga umid qilish mumkin. dnk polimeraza qo'shilishi replikatsiyani tiklash jarayonini yakunlaydi va asl dupleksning ikkita molekulasiga olib kelishi kerak. har safar yangi ferment dozasini qo'shib, butun tsikl takrorlanishi mumkin. biroq, bu taklif o'sha yillarda primerlarni qo'lda ko'p mehnat talab qiladigan sintez va e. coli dan ko'p miqdorda dnk polimerazasini tozalash zarurati tufayli amalga oshmay qoldi. …

3 / 21

ravishda tasvirlangan . sssrda shunga o'xshash shtammlar kamchatkadagi vulqon kelib chiqishi issiq buloqlaridan ajratilgan. t. aquaticus gram-manfiy, novdasimon, oʻta termofil bakteriya boʻlib, geyzerlarda va harorati 55 °c dan yuqori boʻlgan boshqa issiq buloqlarda yashaydi. u yuqori haroratga chidamli fermentlarni, xususan, molekulyar genetik tadqiqotlarda ajralmas reagent bo'lib xizmat qiluvchi taq polimeraza (termostabil dnkga bog'liq dnk polimeraza) ni sintez qiladi. taq polimeraza uchun optimal harorat 70-80 °c dir. 1985 yil mullis va uning ishlab chiqish guruhi 1987 yil 28 iyulda tasdiqlangan patentga murojaat qildi. 1985 yil dekabr oyida science jurnali kari mullisning pcr bo'yicha birinchi maqolasini nashr etdi. , perkinelmer cetus instruments (peci) qo'shma korxonasi ochildi , u pcr tsiklining birinchi prototipini - mr. velosiped . va faqat 1987 yilda birinchi ommaviy qurilma pcr-1000 thermal sotuvga chiqdi. velosipedchi . pcr tamoyili va mexanizmlari pcr dnkning noyob qobiliyatiga asoslanadi. asosiy vazifasi ma'lum bir yuqumli agentga xos bo'lgan dnk fragmentini (rnk), agar u namunada …

4 / 21

ta zanjir hosil bo'lishi bilan "eriydi". - denaturasyon bosqichda har bir ipga primerlar biriktiriladi (50-65 ° ) - primerlarni tavlash 3-bosqichda filamentlar taq polimeraza (72 ° ) yordamida to'ldiriladi - uzaylash (uzaylash) pcr uch bosqichli tsiklik jarayon bo'lib, kuchaytirgichlar deb ataladigan qurilmalarda takrorlanadi va 30-40 marta takrorlanadi. 1 amplifikatsiya siklida hosil bo'lgan yangi dnk zanjirlari 2 ta uchun shablon bo'lib xizmat qiladi ma'lum bir dnk amplikon mahsuloti hosil bo'lgan tsikl . keyingi tsikllarda amplikonlar yangi zanjirlar sintezi uchun shablon bo'lib xizmat qiladi. reaksiya aralashmasida amplikonlar 2n formula bo'yicha shunday to'planadi, bu erda n - kuchaytirish davrlari soni. agar dastlab materialda faqat bitta ikki zanjirli dnk molekulasi mavjud bo'lsa ham, 30-40 tsiklda eritmada 10 ^ 8 amplikon molekulalari to'planadi, pcr komponentlari klassik versiyasi quyidagi komponentlarni talab qiladi: o'z ichiga olgan dnk shablonini kuchaytirilishi kerak . 2. primerlar kerakli o'ziga xos dnk fragmentini pcrni o'tkazish uchun ma'lum bir dnk bo'lagining turli iplarining …

5 / 21

ya aralashmasida nonspesifik bog'lanish jarayonlari, reaktsiya komponentlarini asossiz iste'mol qilish va sezgirlikni yo'qotish sodir bo'ladi. primerlarni dnk zanjiriga bog'lash (tavlash) hududi primerni tanlash mezoni sifatida qabul qilingan mikroorganizmlarning tur o'ziga xosligi doirasidagi mutatsiyalar zonasida bo'lmasligi kerak . bunday hududga kirganda, primerning tavlanishi sodir bo'lmaydi va noto'g'ri salbiy natija ehtimoli ortadi. 3. taq polimeraza ( termostabil dnk polimeraza ). taq polimeraza escherichia dnk polimerazasining gomologidir coli bu ferment dnk polimeraza va 5'-3' ekzonukleaza faolligiga ega, bu uni pcr uchun ajralmas qiladi. c 832 ta aminokislota qoldig'idan iborat . hozirgi vaqtda taq polimerazadan tashqari, boshqa termofillardan, pyrococcus dan ajratilgan termostabil dnk polimerazalari qo'llaniladi. furiosus ( pfu polimeraza), pyrococcus woesei ( pwo polimeraza), termus termofil ( tth polimeraza) va boshqalar. deoksinukleotid trifosfatlar aralashmasi ( dntps ) . ular pcrning "qurilish bloklari" deb ataladigan qurilish materialini ifodalaydi, undan taq polimeraza dnkning ikkinchi zanjirini yaratadi. - deoksiadenozin trifosfat ( datp ), - deoksiguanozin trifosfat ( …

Ko'proq o'qimoqchimisiz?

Barcha 21 sahifani Telegram orqali bepul yuklab oling.

To'liq faylni yuklab olish

"polimeraza zanjirireaktsiyasi (pcr)" haqida

пцр в реальном времени r e j a kirish pcrning kashf etilishi tarixi pcr tamoyili va mexanizmlari pcr komponentlari pcr testining bosqichlari pcr ning afzalliklari polimeraza zanjiri reaktsiyasi zanjir reaktsiya , pcr) - bu in vitro o'rganilayotgan biologik namunadagi ma'lum bir dnk fragmentining (rnk) nusxa ko'chirish sonini ahamiyatsiz miqdordan aniqlanadigan qiymatlarga sezilarli darajada oshirishga imkon beradigan usul . natijada, reaktsiya aralashmasidagi signal kuchayadi, bu patogen genomning ma'lum bir hududini aniqlash va aniqlash imkonini beradi. bu usul sekin o'sadigan, etishtirish qiyin bo'lgan yoki etishtirish mumkin bo'lmagan mikroorganizmlar ko'rsatilganda, shuningdek, serologik va boshqa diagnostika usullarining ma'lumotlari past bo'lgan hollarda hal qiluvchi ahamiyatga ega. ...

Bu fayl PPTX formatida 21 sahifadan iborat (2,4 MB). "polimeraza zanjirireaktsiyasi (pcr)"ni yuklab olish uchun chap tomondagi Telegram tugmasini bosing.

Teglar: polimeraza zanjirireaktsiyasi (… PPTX 21 sahifa Bepul yuklash Telegram