polimeraza zanjiri reaktsiyasi mavzusi

PPTX 22 pages 2.4 MB Free download

Page preview (5 pages)

Scroll down 👇
1 / 22
ptsr v realnom vremeni zahiriddin muhammad bobur nomidagi andijon davlat universiteti tabiy fanlar fakulteti 305-guruh talabalari akbarova nafisa, muhammadro‘ziyeva odinaxon larning polimeraza zanjiri reaktsiyasi mavzusidagi taqdimoti r e j a kirish pcrning kashf etilishi tarixi pcr tamoyili va mexanizmlari pcr komponentlari pcr testining bosqichlari pcr ning afzalliklari polimeraza zanjiri reaktsiyasi zanjir reaktsiya , pcr) - bu in vitro o'rganilayotgan biologik namunadagi ma'lum bir dnk fragmentining (rnk) nusxa ko'chirish sonini ahamiyatsiz miqdordan aniqlanadigan qiymatlarga sezilarli darajada oshirishga imkon beradigan usul . natijada, reaktsiya aralashmasidagi signal kuchayadi, bu patogen genomning ma'lum bir hududini aniqlash va aniqlash imkonini beradi. bu usul sekin o'sadigan, etishtirish qiyin bo'lgan yoki etishtirish mumkin bo'lmagan mikroorganizmlar ko'rsatilganda, shuningdek, serologik va boshqa diagnostika usullarining ma'lumotlari past bo'lgan hollarda hal qiluvchi ahamiyatga ega. amalga oshirishning soddaligi, yuqori sezuvchanlik va o'ziga xoslik bu usulni butun dunyoda mashhur qildi. pcr tufayli o'rganilayotgan materialning u yoki bu turida yuqumli agentlarning juda oz miqdordagi …
2 / 22
imcha nukleotidlarni biriktirish yo'li bilan qisqa oligonukleotid primerlarini (bir zanjirli sun'iy sintez qilingan dnk molekulalari) kengaytirish imkonini berdi, agar primer dnk shabloniga komplementar bo'lsa. 1970-yillar boshida nobel mukofoti laureati x.korananing laboratoriyasidan norvegiyalik olim x.kleppe 80-90 °c gacha qizdirish orqali ikkala zanjirni ajratib, yangi hosil boʻlgan dnk segmentlarini ikki barobarga oshirish usulini taklif qildi. pcrning kashf etilishi tarixi keri b. mullis (1944–2019) 1971 yilda ushbu texnikani tavsiflovchi birinchi nashrda kleppe va boshqalar shunday yozgan: " dnk dupleksi ( ya'ni dnkning qo'sh zanjiri ) bitta zanjir hosil qilish uchun denatüratsiya qilinishi kerak. ushbu bosqich ikkita mos primerning etarlicha katta ortiqcha mavjudligida amalga oshiriladi. sovutgandan so'ng, har biri astar bilan mos ravishda murakkablashtirilgan shablon zanjirining butun uzunligini o'z ichiga olgan ikkita strukturani olishga umid qilish mumkin. dnk polimeraza qo'shilishi replikatsiyani tiklash jarayonini yakunlaydi va asl dupleksning ikkita molekulasiga olib kelishi kerak. har safar yangi ferment dozasini qo'shib, butun tsikl takrorlanishi mumkin. biroq, bu …
3 / 22
976 yilda amerikalik biokimyogarlar a. chien va uning hamkasblari tomonidan tavsiflangan . shuningdek, bu ferment 1980 yilda sovet biokimyogarlari a. kaledin , a. slyusarenko va s. gorodetskiy tomonidan mustaqil ravishda tasvirlangan . sssrda shunga o'xshash shtammlar kamchatkadagi vulqon kelib chiqishi issiq buloqlaridan ajratilgan. t. aquaticus gram-manfiy, novdasimon, oʻta termofil bakteriya boʻlib, geyzerlarda va harorati 55 °c dan yuqori boʻlgan boshqa issiq buloqlarda yashaydi. u yuqori haroratga chidamli fermentlarni, xususan, molekulyar genetik tadqiqotlarda ajralmas reagent bo'lib xizmat qiluvchi taq polimeraza (termostabil dnkga bog'liq dnk polimeraza) ni sintez qiladi. taq polimeraza uchun optimal harorat 70-80 °c dir. 1985 yil mullis va uning ishlab chiqish guruhi 1987 yil 28 iyulda tasdiqlangan patentga murojaat qildi. 1985 yil dekabr oyida science jurnali kari mullisning pcr bo'yicha birinchi maqolasini nashr etdi. , perkinelmer cetus instruments (peci) qo'shma korxonasi ochildi , u pcr tsiklining birinchi prototipini - mr. velosiped . va faqat 1987 yilda birinchi ommaviy qurilma …
4 / 22
anilayotgan namunada mavjud bo'lsa. pcr yordamida dnkning nisbatan qisqa qismlari kuchaytiriladi , ularning uzunligi 3000 ta asosiy juftdan oshmaydi. 1-bosqichida dnk zanjiri yuqori harorat ta'sirida (95 ° ) ikkita zanjir hosil bo'lishi bilan "eriydi". - denaturasyon bosqichda har bir ipga primerlar biriktiriladi (50-65 ° ) - primerlarni tavlash 3-bosqichda filamentlar taq polimeraza (72 ° ) yordamida to'ldiriladi - uzaylash (uzaylash) pcr uch bosqichli tsiklik jarayon bo'lib, kuchaytirgichlar deb ataladigan qurilmalarda takrorlanadi va 30-40 marta takrorlanadi. 1 amplifikatsiya siklida hosil bo'lgan yangi dnk zanjirlari 2 ta uchun shablon bo'lib xizmat qiladi ma'lum bir dnk amplikon mahsuloti hosil bo'lgan tsikl . keyingi tsikllarda amplikonlar yangi zanjirlar sintezi uchun shablon bo'lib xizmat qiladi. reaksiya aralashmasida amplikonlar 2n formula bo'yicha shunday to'planadi, bu erda n - kuchaytirish davrlari soni. agar dastlab materialda faqat bitta ikki zanjirli dnk molekulasi mavjud bo'lsa ham, 30-40 tsiklda eritmada 10 ^ 8 amplikon molekulalari to'planadi, pcr komponentlari klassik versiyasi …
5 / 22
o'lishi kerak : bo'ling . primerlarning 3' uchlariga alohida e'tibor beriladi, chunki aynan ulardan taq polimeraza komplementar dnk zanjirini qurishni yakunlay boshlaydi. etarlicha o'ziga xoslik bo'lmasa, reaktsiya aralashmasida nonspesifik bog'lanish jarayonlari, reaktsiya komponentlarini asossiz iste'mol qilish va sezgirlikni yo'qotish sodir bo'ladi. primerlarni dnk zanjiriga bog'lash (tavlash) hududi primerni tanlash mezoni sifatida qabul qilingan mikroorganizmlarning tur o'ziga xosligi doirasidagi mutatsiyalar zonasida bo'lmasligi kerak . bunday hududga kirganda, primerning tavlanishi sodir bo'lmaydi va noto'g'ri salbiy natija ehtimoli ortadi. 3. taq polimeraza ( termostabil dnk polimeraza ). taq polimeraza escherichia dnk polimerazasining gomologidir coli bu ferment dnk polimeraza va 5'-3' ekzonukleaza faolligiga ega, bu uni pcr uchun ajralmas qiladi. c 832 ta aminokislota qoldig'idan iborat . hozirgi vaqtda taq polimerazadan tashqari, boshqa termofillardan, pyrococcus dan ajratilgan termostabil dnk polimerazalari qo'llaniladi. furiosus ( pfu polimeraza), pyrococcus woesei ( pwo polimeraza), termus termofil ( tth polimeraza) va boshqalar. deoksinukleotid trifosfatlar aralashmasi ( dntps ) . …

Want to read more?

Download all 22 pages for free via Telegram.

Download full file

About "polimeraza zanjiri reaktsiyasi mavzusi"

ptsr v realnom vremeni zahiriddin muhammad bobur nomidagi andijon davlat universiteti tabiy fanlar fakulteti 305-guruh talabalari akbarova nafisa, muhammadro‘ziyeva odinaxon larning polimeraza zanjiri reaktsiyasi mavzusidagi taqdimoti r e j a kirish pcrning kashf etilishi tarixi pcr tamoyili va mexanizmlari pcr komponentlari pcr testining bosqichlari pcr ning afzalliklari polimeraza zanjiri reaktsiyasi zanjir reaktsiya , pcr) - bu in vitro o'rganilayotgan biologik namunadagi ma'lum bir dnk fragmentining (rnk) nusxa ko'chirish sonini ahamiyatsiz miqdordan aniqlanadigan qiymatlarga sezilarli darajada oshirishga imkon beradigan usul . natijada, reaktsiya aralashmasidagi signal kuchayadi, bu patogen genomning ma'lum bir hududini aniqlash va aniqlash imkonini beradi. bu usul sekin o'sadigan, et...

This file contains 22 pages in PPTX format (2.4 MB). To download "polimeraza zanjiri reaktsiyasi mavzusi", click the Telegram button on the left.

Tags: polimeraza zanjiri reaktsiyasi … PPTX 22 pages Free download Telegram