fitoviruslarni ajratish usullari mashg’uloti

DOCX 6 стр. 19,3 КБ Бесплатная загрузка

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇
1 / 6
11- laboratoriya mashg’uloti. fitoviruslarni ajratish usullari mashg’ulotning maqsadi: talabalarga fitoviruslar haqida ma’lumot berish. fitoviruslarni ajratish usullarini o’rgatish. fitoviruslarni ajratish borasidagi ishlarni o’rganib chiqish. nazariy qism: har qanday virus hujayrada bo’lib, uni toza holda olish uchun hujayaraning asosiy elementlaridan ajratiladi. muqobil hujayra – hujayra po’sti, sitoplazma membranasi, uning ichki tomonida jelatinasimon sitoplazmadan iborat. sitopazmada esa har xil kiritmalar, kraxmal donalarini tutuvchi xloroplastlar, mitoxondriyalar va yadro bor. hujayrada vakuola, endoplazmatik to’r ribosomalar mavjud. virus tozalashning birinchi bosichi, hujayraning parchalab virusli shirani ajratib olish – ekstraksiya qilishdir. shira murakkab aralashmadan tashkil topgan. ular ichida o’simlik shirasidagi ba’zi qismlarni parchalab, virus faolligini yo’qotadigan fermentlar bor. shira ancha beqaror bo’lib, ph past bo’ladi. bunda eng yirik tarkibiy qismlar (xlorolastlar, mitoxondriyalar) kraxal donalari hujayra po’sti fragmentlari bo’lib, ularni ancha past darajada sentrafugalash (minutig 5000-7000 ayl.tezligi) yordamida cho’kmaga tushirish mumkin. shirada mayda molekulali massaga ega – qandlar, aminokislotalar, tuzlar va ulardan yirikroq oqsillar, ribosomalar, mikrosomalar (endoplazmatik to’rining …
2 / 6
a hujayrasiga ko'chirib o'tkazadigan sistema -plazmidalardir. bu yangi imkoniyatlarni bergan maanba transmissiv ko'chirib o'tkazuvchi halqali molekulalar -plazmidlar va mo'tadil viruslar vektor deb ataladi.(7- jadval) ushbu imkoniyat tabiatning biologlarga taqdim qilingan sovg'a hisoblanadi. shunday ekan, bu yaratilgan imkoniyat natijasida prokariotlarni kulturada insonlar uchun kerakli oqsillarni, fermentlarni sintezlash uchun yangi rejalar tuzish imkoniyati yaraldimikan degan savol tug'iladi? natijada bu g'oyalarning amalda yuzaga chiqishi gen injenerligi yoki genetik muxandislik deb ataladigan va katta istiqbolga ega bo'lgan yangi sohaning dunyoga kelganligi olamshumul kashfiyot bo’lganligidan darak beradi. 7-jadval vektorlar nusxalar miqdori o'lchami, ming nukleotidlar klonlash uchun plazmid vektorlari: pbr 322 pacu 184 40-50 20 4,4 4,0 klonlashda maxsus kattalikdagi vektorlar: l chron 4a kosmida phc 79 100-200 20 41,8 6,4 genlar ekspressiyasi uchun plazmid vektorlari: p trp ed5-1 40-50 6,7 hozirda gen muxandisligi qisqacha aytganda, genlar ustida turli tajribalar o'tkazish, ularni to'la o'rganish asosida funksional qismlarga bo'lish, genlarni kerakli joyidan kesish, genlarning kerak emas qismini …
3 / 6
uyidagicha ta’rif berilmoqda, ya’ni klon bu bitta hujayradan kelib chiqqan hujayralar populyasiyasidir. klonlashda asosisy e’tibor mutant hujayralar olishga qaratiladi. tajriba kerakli asbob va reafaollar. tamaki mozaika virusi bilan kasallangan tamaki bargi na’munalari (500 g); ph 7,0-7.5; xloroform 0,1 n naoh;. 0,1 n hc1; ammoniy sulfat; edta; 0,1m fosfat buferi, virus ekstraksiyagida ishlatiladigan asbob- uskuna va idishlar. ishning borishi: virus bilan kasallangan o‘simlik bargi 1:1 nisbatdagi 0,1m fb (ph 7,5) bilan gomogenizatsiya qilinib, xloroform bilan ishlov berilib tozalangan virusdan ajratib olingan ekstraktga 20% ammoniy sulfati solinib aralashtiriladi. keyin ushbu aralashmani 30 minut davomida sovutgichda saqlanadi, natijada cho‘kmaga ko’p miqdorda quyqa moddalar tushadi. ularni minutiga 3 ming ayl/tezligida 20 daqiqa davomida sentrifugaga qo’yiladi. chuo‘kmaning ustki suyuqligiga 25% gacha ammoniy sulfat solinadi va aralashtiriladi.so’ngra yana 60 minut kristallar hosil bo‘lishi uchun sentrafugada saqlanadi. keyinchalik virusli idish virus to‘liq kristallanishi va cho‘kmaga tushushi uchun kechasiga sovutgichda qoldiriladi. ertasiga filtr yordamida cho‘kma usti suyuqligi ajratiladi. …
4 / 6
15-18 ming ayl/tezligida sentrifuda saqlanadi. cho‘kmadagi keraksiz qismlar tashlab yuboriladi. virusli eritmaning ustki qismi qaytadan 25% li sulfat ammoniy bilan cho‘ktiriladi va 20-30 minutdan so‘ng 20 minut davomida 6 ming ayl/tezligida sentrifugaga qo’yiladi. cho‘kmaning ustidagi suyuqlik tashlab yuboriladi, cho‘kmali stakan esa toza filtr qog‘ozning ustiga to‘ntarib qo‘yiladi. keyinchalik cho‘kmani 20 ml 0,01m fosfat buferida (ph 7,0- 7,5) yaxshilab eritiladi va 15-18 ming aylanish tezligida sentrifugada qo’yilib, erimagan qismidan ajratib olinadi. shu usulda ajratib olingan va tozalangan preparatdan endi bemalol foydalanish mumkin bo’ladi. mashg’ulot davomida olingan xulosalar: mustahkamlash uchun nazorat savollari: 1. fitoviruslar nima? 2. fitoviruslarni qanday ajratib olinadi? 3. fitoviruslarni ajratish bosqichlarini izohlang? 4. fitoviruslarga qarshi kurash choralari ? 5. virusga chalingan o’simlik belgilari haqida ma’lumot bering ? laboratoriya mashg’uloti yuzasidan topshiriq va vazifalar: adabiyotlar: 1. мирзарахметова д.т. основы биологической специфичности. услубий қўлланма. тошкент: узму. 2006. 112с. 2. davronov q. biotexnologiya: ilmiy va amaliy uslubiy asoslar.toshkent 2008 yil.504 bet. 3. …
5 / 6
siyaning berilishi quyidagi jarayonlarning qaysi biriga to‘g‘ri keladi ? a.transduksiya s.terminatsiya b.translyatsiya d.transpoditsiya

Хотите читать дальше?

Скачайте все 6 страниц бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "fitoviruslarni ajratish usullari mashg’uloti"

11- laboratoriya mashg’uloti. fitoviruslarni ajratish usullari mashg’ulotning maqsadi: talabalarga fitoviruslar haqida ma’lumot berish. fitoviruslarni ajratish usullarini o’rgatish. fitoviruslarni ajratish borasidagi ishlarni o’rganib chiqish. nazariy qism: har qanday virus hujayrada bo’lib, uni toza holda olish uchun hujayaraning asosiy elementlaridan ajratiladi. muqobil hujayra – hujayra po’sti, sitoplazma membranasi, uning ichki tomonida jelatinasimon sitoplazmadan iborat. sitopazmada esa har xil kiritmalar, kraxmal donalarini tutuvchi xloroplastlar, mitoxondriyalar va yadro bor. hujayrada vakuola, endoplazmatik to’r ribosomalar mavjud. virus tozalashning birinchi bosichi, hujayraning parchalab virusli shirani ajratib olish – ekstraksiya qilishdir. shira murakkab aralashmadan tashkil to...

Этот файл содержит 6 стр. в формате DOCX (19,3 КБ). Чтобы скачать "fitoviruslarni ajratish usullari mashg’uloti", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: fitoviruslarni ajratish usullar… DOCX 6 стр. Бесплатная загрузка Telegram