fitoviruslarni tozalash usullari

DOCX 8 стр. 127,3 КБ Бесплатная загрузка

8 стр.

FaylHub.uz

Скачать через Telegram

Размер 127,3 КБ

Тип файла DOCX

Страницы 8

Обновлено Дек 2025

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇

1 / 8

12- laboratoriya mashg’uloti. fitoviruslarni tozalash usullari ishdan maqsad. talabalarga fitoviruslar haqida ma’lumot berish, ajratish usullarini o’rgatish, fitoviruslarni ajratish borasidagi ishlarni o’rganib chiqish. har xil tezlikda moddalarni cho‘kmaga tushishiga asoslanib viruslarni toza preparatini olish usuli bilan tanishtirish. nazariy qism: hujayrada ko'chib yuruvchi genetik elementlar transpozitsion elementlar yoki transpozonlar ataladi. transpozonlar turli-tuman strukturaga ega bo'lsalar ham, barcha transpozon molekulalarining ikki chetki qismida maxsus nukleotidlar izchilligi, markaziy qismida esa dnk molekulasining belgilangan joyida "yopishqoq" uchlarni hosil qilib kesadigan transpozaza fermentini sintez qiluvchi gen mavjud. ushbu ferment yordamida hujayradagi ranspozaza fermenti dnk molekulasini " yopishqoq" uchlarini hosil qilish orqali kesadi va ayni paytda transpozon uchlariga yopishtiriladi.natijada hosil bo'lgan ikki xil dnk ya’ni xromosoma dnksi va transpozon dnksidan qovushma holatida hujayragi dnk qismlarini bir biriga bog’laydigan ligaza fermenti ta'sirida bir biriga bog'lanadi. transpozonlarning hujayra dnksiga integrasiya jarayoni quyidagicha kechadi: viruslar shunchalik kichikki, ularni faqat elektron mikroskop ostida kuzatish mumkin . virusning tuzilishi virus genomini o'rab …

2 / 8

ar. laboratoriyada rekombinant dnk olish va genlarni klonlash birinchi marta 1972 yilda aqsh olimlari koyen va boyer tomonidan amalga oshirilgan. bu olimlar e.coli(ichak tayoqchasi) bakteriyasining xromosoma dnksiga va shu bakteriya plazmidasiga alohida joylarda ecori restriktaza fermenti bilan ishlov berganlar va plazmida tarkibida faqatgina 1 dona ecori restriktaza fermentini tanib kesadigan maxsus nukleotidlar izchilligi bo'lganligi sababli ferment plazmidaning xalqasimon dnk qo'sh zanjirini faqat bir joydan kesa oladi va plazmidani “yopishqoq” uchli ochiq holatga o'tkazadi. xromosoma qismining dnk molekulasida ecori restriktaza fermenti taniy oladigan maxsus nukleotidlar izchilligi qanday holatda bo’lsa , bu molekula shunchalik ko’p bo'lakka bo'lina oladi.bu esa ushbu fermentning rivojlanishi va hujayradagi yod moddalarni kesib tashlashi uchun keng imkoniyatlar yaratadi. turli xil o'lchamga va strukturaga ega bo'lgan dnk molekulasi elektroforez usulida ajratib olinadi. ajratib olingan yopishqoq uchli xromosoma dnksi bo'lagi ochiq holatdagi huddi shunday yopishqoq uchli plazmid dnksi bilan aralashtirilgan holda ligaza fermenti yordamida ulanadi. natijada plazmid tarkibiga xromosoma dnk …

3 / 8

l qiladi. natijada hosil bo'lgan dnk dagi bir zanjirli bo'sh joylar dnk-polimeraza fermenti yordamida qayta to’ldiriladi va tiklanadi. ikkinchi usul hisoblangan restriktaza-ligaza usuli eng oson va sodda rekombinant dnk olish usulidir. mazkur usulda dnk molekulasi va vektor plazmida yopishqoq uchlar hosil qiluvchi restriktaza bilan kesladi va aralashtiriladi. komplementarlik xususiyatiga ko'ra dnk molekulalari o'zaro vodorod bog'lari yordamida birikkan holatda xalqasimon struktura yuzaga keltiradi va dnk zanjirining birikmagan joylari dnk-ligaza fermenti oqali biriktiriladi. uchinchi linker molekulalaridan foydalanish usulida dnk molekulasiga va vektor plazmidaga t4 fag dnk-ligaza fermenti yordamida maxsus nukleotid ketma-ketligiga ega bo'lgan linker molekula biriktiriladi va olingan ikki turdagi dnk molekulasi restriktaza fermenti bilan qirqiladi. tajriba kerakli materiallar. sentrifuga va uning rotorlari, probirkalari, shpris va virus tozalashning boshqa metodlarida ishlatilgan materiallar. ishning bajarilish tartibi. sentrifuganing yaxshilab yuvilib quritilgan probirkalariga virusli eritma ( avvalgi mashg‘ulotdagi qisman tozalangan virusli namuna) sentrifuga qopqog‘idagi qarash teshikchasigacha quyiladi, so‘ngra probirkalar tarozi yordamida tenglashtirilib, qopqoqlar avval qo‘l …

4 / 8

rida (ph-7,6) eriydi. agar virus yaxshi tozalangan bo‘lsa oq-havorang opalessensiya jarayoni kuzatiladi. eritmani 15-18 ming ayl./tezligida sentrifugalanash va erimagan qismidan ajratish mumkin. erimagan cho‘kmani yana bir marta 1-2 ml buferda eritib, cho‘ktirib, cho‘kmausti suyuqligini asosiy virus eritmasiga qo‘shiladi va saqlanadi. shu differensial sentrifugalash siklini 3 - 4 marta qaytarib yetarlicha tozalangan virus preparati olinadi. viruslarning o’rtacha o‘lchamlari (10-600 nm) va zichliklariga ular markazdan qochma kuchini 30000 dan 200000g ta’sir ettirilsa, virus zarralari cho‘kmaga holatiga keladi. shuning uchun sentrifugalarning rotorlarini minutiga 50000 — 60000 marta aylanadigan sentrifugalari ishlatiladi. differensial sentrifuga usulida virus tozalagandan so’ng virusni suspenziyada cho‘ktiramiz va boshqatdan suspenziya holatiga keltiramiz. keyingi jarayonda sovuqda magnit aylantirgichida aylantiriladi hamda past tezlikda sentrifugada saqlanadi (6000 g, 30 min). bu jarayonni qayta qayta takrorlash mumkin. ammo bunday suusllar bilan hayvon viruslarini, bakteriofaglarni bir sikl differensial sentrifugalash bilan tozalash juda qiyin bo‘lishi mumkin. bunda avval har xil usullarda (m., ionalmashish xromatografiyasi) virus tozalash bosqichlaridan …

5 / 8

dan amaliy mashg’ulotlar o’tkazish buyicha uslubiy qo’llanma. toshkent: o’zmu. 2007. 56 b. laboratoriya mashg’ulotini mustahkamlash uchun test savollari: 1. yomon sifatli o‘smalar va ma’lum mikroorganizm guruhlariga nisbatan fiziologik jihatdan faol bo‘lgan hayotiy faoliyat mahsuloti. a.antibiotiklar b.garmonlar s.interferanlar d.interlekinlar 2. yuqumli viruslarning ta’siriga javoan inson va hayvon hujayralari nima ajratadi? a.interleykinlar b.antibiotiklar s.garmonlar d.interferonlar 3. immun javobini tashkil qilishda qatnashadigan kalta polipeptidlar? a.interleykinlar b.interfironlar s.antibiotklar d.garmonlar 4. rekombinat vaksinalar qanday olinadi? a.sigir o‘lati viruslaridan foydalaniladi b.kasallik qo‘zg‘atuvchi genlar klonlashtiriladi s.v - gibridon hujayralari maxsulotlari d.to‘g‘ri javob yo‘q 5. vaksina antigenlar qanday olinadi? a. kasallik qo‘zg‘atuvchi genlar klonlashtiriladi b.sigir o‘lati viruslaridan foydalaniladi s.v - gibridon hujayralari maxsulotlari d.to‘g‘ri javob yo‘q 6. manoklonal antitelalar nima? a.v - gibridon hujayralari maxsulotlari b.kasallik qo‘zg‘atuvchi genlar klonlashtiriladi s.sigir o‘lati viruslaridan foydalaniladi d.to‘g‘ri javob yo‘q 7. oziq biomassasida oqsil, nukliyen kislotalar va lipidlar qancha miqdorda bo‘lishi kerak? a.80%, 2%, 1% b.90%, 1%, 0,5% s.60%, 10%, 5% d.10%, …

Хотите читать дальше?

Скачайте все 8 страниц бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "fitoviruslarni tozalash usullari"

12- laboratoriya mashg’uloti. fitoviruslarni tozalash usullari ishdan maqsad. talabalarga fitoviruslar haqida ma’lumot berish, ajratish usullarini o’rgatish, fitoviruslarni ajratish borasidagi ishlarni o’rganib chiqish. har xil tezlikda moddalarni cho‘kmaga tushishiga asoslanib viruslarni toza preparatini olish usuli bilan tanishtirish. nazariy qism: hujayrada ko'chib yuruvchi genetik elementlar transpozitsion elementlar yoki transpozonlar ataladi. transpozonlar turli-tuman strukturaga ega bo'lsalar ham, barcha transpozon molekulalarining ikki chetki qismida maxsus nukleotidlar izchilligi, markaziy qismida esa dnk molekulasining belgilangan joyida "yopishqoq" uchlarni hosil qilib kesadigan transpozaza fermentini sintez qiluvchi gen mavjud. ushbu ferment yordamida hujayradagi ranspozaza fer...

Этот файл содержит 8 стр. в формате DOCX (127,3 КБ). Чтобы скачать "fitoviruslarni tozalash usullari", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: fitoviruslarni tozalash usullari DOCX 8 стр. Бесплатная загрузка Telegram