polimeraza zanjir reaksiyasi

PPTX 29 стр. 783,3 КБ Бесплатная загрузка

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇
1 / 29
genetika va genomika asoslari genetika va genomika asoslari mavzu: polimeraza zanjir reaksiyasi. n mashg’ulotning maqsadi: ushbu mavzu doirasida polimeraza zanjir reaksiyasini video roliklar yordamida o‘rganish. kerakli asbob-uskunalar: polimeraza zanjir reaksiyasini video roliklar yordamida o‘rganish. amaliy mashg’ulotni bajarishda rioya qilinadigan texnika xavfsizlik qoidalari: polimeraza zanjir reaksiyasini video roliklar yordamida o‘rganish. ishning bajarilishi 1. polimereza zanjir reaksiyasi 2. muton, rekon va sistron kabi tushunchalar 3. takroriy ketma-ketlik sinflari. полимераза занжир реакцияси (pzr) molekularbiologik usul bo‘lib, in vitro aniq bir dnk fragmentinusxasini juda katta miqdorda ( 1012 marotabagacha) oshirish imkonini beradi. полимераза занжир реакцияси (pzr) методи молекуляр биологияда жуда муҳим ўрин тутиб, ушбу усул 1983-йили колифорниядаги сетус компаниясининг биохимиги кери мюллис томонидан кашф этилган. бу кашфиёти учун кери мюллис 1993-йилда нобел мукофотига сазовор бўлган. бу усулнинг яратилишига днк полимераза ферментининг яратилиши сабаб бўлган. ушбу фермент пзр методи бўйича борадиган анализ жараёнларини катализлайди ва назорат қилади. бу ферментнинг муҳим аҳамияти шундаки, у иссиқликка чидамли …
2 / 29
µl taq днк полимераза 5 бирл./µl 0,2 µl геном днк 1 µl дистилланган ва стерилланган сув 6,5 µl пзр жараёни босқич номи ҳарорат вақт цикл бошланғич денатурация 940c 2 дақиқа 1 денатурация 940c 20 сония 45 праймернинг днкга жойлашуви даражаси 550c ± 50c 30 сония 45 элонгация 720c 50 сония 45 якунловчи элонгация 720c 7 дақиқа 1 usul sun’iy sharoitda fermentlardan foydalangan xolda dnkning aniq bir uchastkasini ko‘p marotaba tanlov asosida nusxa olishiga asoslangan. shu bilan bir qatorda faqatgina berilgan shartlarni qondiruvchi dnk uchastkasidan nusxa olinadi va u tadqiq qilinayotgan sharoitda mavjud bo‘lishi kerak. tirik organizmlar hujayrasida kechuvchi dnk replikatsiyasi jarayonidan farqli ravishda pzr yordamida dnkning nisbatan kichik uchastkalari amplifitsirlanadi (odatda 3000 juft nukleotiddan ortmaydi, lekin shunday usullar mavjudki nukleotid jufti sonini 20 minggacha "ko‘taradi" u long range pcr deb nomlanadi). xaqiqatdan, pzr dnk fragmentining ko‘p marotabalik sun’iy replikatsiyasi sanaladi. dnk -polimerazalar shunday tuzilganki, faqatgina matritsa va monomerlarga ega xolatda …
3 / 29
ddalar (ularni reaksiyada qo‘llaniluvchi maxsus buferlarga joylashtirishadi) joylanadi. matritsaga komplementar bo‘lgan dnkni sintezlash uchun praymerlardan biri u bilan vodorod bog‘ini xosil qilishi kerak (bu otjig deb nomlanadi). lekin, matritsa bunday bog‘ni ikkinchi zanjir bilan xosil qilib olishi mumkin. demak, dastlab dnkni qizdirib olish kerak -bunda vodorod bog‘lari uziladi. bu ish oddiy qizdirish orqali amalga oshiriladi (t 95 °c gacha) -bosqich denaturatsiya deb nomlanadi. ammo, endi yuqori xarorat sabab praymerlar matritsaga bog‘lana olmaydi. xarorat 50-65 °c ga qadar pasaytirilganda praymerlar matritsa bilan bog‘lanadi, shundan so‘ng xarorat bir oz ko‘tariladi (polimerazaning optimal ishlash xaroratiga qadar, o‘rtacha 72 °c). shunda polimeraza matritsaga komplementar bo‘lgan dnk zanjirini sintezlay boshlaydi -buni elongatsiya deb atashadi (8-rasm). mana shunday bir bosqichdan so‘ng kerakli fragmentning nusxasi ikki karra ortadi. ammo, buni yana bir bor qaytarishga xech narsa qarshilik qilmaydi. qaytarish bir emas bir necha o‘n marotaba bajariladi. xar bir qaytarilishdan so‘ng mavjud dnk fragmentining miqdori ikki marotabaga ortib …
4 / 29
nomlanadi). lekin, matritsa bunday bog‘ni ikkinchi zanjir bilan xosil qilib olishi mumkin. demak, dastlab dnkni qizdirib olish kerak -bunda vodorod bog‘lari uziladi. bu ish oddiy qizdirish orqali amalga oshiriladi (t 95 °c gacha) -bosqich denaturatsiya deb nomlanadi. ammo, endi yuqori xarorat sabab praymerlar matritsaga bog‘lana olmaydi. xarorat 50/65 °c ga qadar pasaytirilganda praymerlar matritsa bilan bog‘lanadi, shundan so‘ng xarorat bir oz ko‘tariladi (polimerazaning optimal ishlash xaroratiga qadar, o‘rtacha 72 °c). shunda polimeraza matritsaga komplementar bo‘lgan dnk zanjirini sintezlay boshlaydi -buni elongatsiya deb atashadi. mana shunday bir bosqichdan so‘ng kerakli fragmentning nusxasi ikki karra ortadi. ammo, buni yana bir bor qaytarishga xech narsa qarshilik qilmaydi. qaytarish bir emas bir necha o‘n marotaba bajariladi. xar bir qaytarilishdan so‘ng mavjud dnk fragmentining miqdori ikki marotabaga ortib boraveradi, chunki yangi xosil bo‘lgan molekulalar keyingi sikl uchun matritsa sifatida qo‘llaniladi. aslini olganda pzrning effektivligi u qadar yuqori emas, ideal xolatda esa shunday, real sonlar ham …
5 / 29
archa genetiklar tomonidan e'tirof etiladi. har bir gen nukleotidlar izchilligidan tashkil topgan va oqsil kodlaydigan ekzonlardan va oqsil kodlamaydigan intron ketma-ketliklardan tashkil topgan. bundan tashqari gen faoliyatini boshqaradigan qator elementlar ham mavjud. intronlar va ekzonlar dnk ma’lum bir uchastkasida joylashgan «uzluksiz genlar» hisoblanadi. bu genlar haqidagi ma’lumotlar birinchi bo‘lib, 1977 yilda sichqonlardagi globina geni va plodovoy mushki drosophilamelanogasterlarning ribosoma genlari ustida olib borilgan izlanishlar natijasida aniqlandi. 29 intronlar – bular dnkning ma’lum bir uchastkasida joylashgan, ekspressiyani buzadi, kodirlanmaydi. bir genda bir qancha intronlar joylashadi. masalan, tovuqning tuxum albumini genida 8 ta intron borligi aniqlangan. ko‘p hollarda intronlarning soni ko‘p bo‘ladi. masalan, kollagenning b2- zanjirida intronlar soni 50 tagacha boradi. ekzonlar – bular dnkning ma’lum bir uchastkasida joylashgan kodirlanuvchi qism. takroriy ketma-ketliklar beshta sinfga bo’linadi. transpozonlar transpozonlar (faol yoki nofaol) genomning aksariyat qismini (45%) tashkil qiladi. barcha transpozonlar bir necha nusxadan iborat. transpozonlar – organizmda uchraydigan dnk qismi bo‘lib,o‘z joyini o‘zgartirish …

Хотите читать дальше?

Скачайте все 29 страниц бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "polimeraza zanjir reaksiyasi"

genetika va genomika asoslari genetika va genomika asoslari mavzu: polimeraza zanjir reaksiyasi. n mashg’ulotning maqsadi: ushbu mavzu doirasida polimeraza zanjir reaksiyasini video roliklar yordamida o‘rganish. kerakli asbob-uskunalar: polimeraza zanjir reaksiyasini video roliklar yordamida o‘rganish. amaliy mashg’ulotni bajarishda rioya qilinadigan texnika xavfsizlik qoidalari: polimeraza zanjir reaksiyasini video roliklar yordamida o‘rganish. ishning bajarilishi 1. polimereza zanjir reaksiyasi 2. muton, rekon va sistron kabi tushunchalar 3. takroriy ketma-ketlik sinflari. полимераза занжир реакцияси (pzr) molekularbiologik usul bo‘lib, in vitro aniq bir dnk fragmentinusxasini juda katta miqdorda ( 1012 marotabagacha) oshirish imkonini beradi. полимераза занжир реакцияси (pzr) методи мол...

Этот файл содержит 29 стр. в формате PPTX (783,3 КБ). Чтобы скачать "polimeraza zanjir reaksiyasi", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: polimeraza zanjir reaksiyasi PPTX 29 стр. Бесплатная загрузка Telegram