genomika metodlari

PPT 37 pages 5,9 MB Free download

Page preview (5 pages)

Scroll down 👇
1 / 37
principe de la pcr biologiya yo'nalishi talabalari uchun “genomika” fanidan “genomika metodlari” mavzusidagi dars taqdimoti genomning dnk darajasidagi tahlili 1. polimer zanjir reaktsiyasi (pzr) 2. elektroforez 3. restriktsiyalash 4. molekulyar klonlash 5. sekvenslash polimer zanjir reaktsiyasi (pzr) biologik material yoki namunadagi kam kontsentratsiyali ma'lum bir dnk fragmentlarining ortishiga imkon beruvchi molekulyar biologiyadagi ekspremental usuldir; dnk polimeraza va teskari transkriptsiya fermentlari ishtirokida dnk bo'laklarining sezilarli darajada ortishiga imkon yaratadi; genomika va biologik tibbiyotda keng qo'llaniladi; 1983 yilda amerikalik bioximik keri myullis tomonidan kashf qilingan; pzr amplifikator asbobi yordamida amalga oshiriladi. ptsr texnologiyasi bu- qisqa vaqt ichida ma'lum dnk fragmentidan sun'iy ravishda minglab nusxalarini olish imkonini beradi. bunda dastlab olingan dnk molekulasi isitiladi, spirali to'g'irlanadi va ikki komplementar zanjiri bir-biridan ajratiladi. so'ngra praymerlar yordamida matritsa dnk zanjiridan komplementarlik asosida sun'iy dnk ning ikkinchi zanjiri sintezlanadi. polimer zanjir reaktsiyasining asosiy komponentlari bufer eritma dnk matritsa ikkita praymer dnk polimeraza magniy ioni dntr bu …
2 / 37
ga qarab ajratish va identifikatsiyalashga asoslangan usul; bu usulda elektr maydondagi gel ta'sirida dnk fragmentlari turli tezlikda harakatlanadi; dnk molekulalarining uglevod-fosfat qoldiqlari manfiy zaryadlanganligi uchun bo'laklar manfiy katoddan musbat anodga tomon ko'chadi. elektroforez elektroforez bufer eritma (edta, tris, tbe, tae) bilan to'ldirilgan kamerada boradi. odatdagi sharoitda dnk ning elektroforetik tahlili uchun agaroza gelidan foydalaniladi (dnk fragmentlari 100 juft asosdan ko'p bo'lganda). agar ajratilayotgan dnk bo'laklari bir necha 10 juft asosdan iborat bo'lsa (sekvenslash uchun) akrilamid geli ishlatiladi. dnk fragmentlari elektroforezga joylashtirishdan oldin ksilen (havorang) yoki bromfenol (siyohrang) bo'yog'ida bo'yaladi. poliakrilamid gelidagi elektroforez agaroza gelidagi elektroforez elektroforez metodini amalga oshirish bosqichlari dnk fragmentlarining geldagi migratsiya tezligi quyidagilarga bog'liq: dnk o'lchamiga agarozaning kontsentratsiyasiga dnk ning konformatsiyasiga agaroza tipiga elektroforezdagi buferga elektr maydon kuchlanishiga asoslar tarkibi va haroratga restriktsiyalash- restriktaza yoki endonukleaza deb ataluvchi fermentlar yordamida dnk molekulasini spetsifik bo'laklarga bo'lish. dnk molekulasining 5 1 uchida fosfat, 3 1 uchida gidroksil gruppa bo'ladi. …
3 / 37
i. 2 tip fermentlar 4-6 tagacha nukleotidlarni taniy oladi. restriktazalarning kesishi: to'mtoq uch hosil qilib yopishqoq uch hosil qilib restriktsiya mexanizmlarini o'rganishning ahamiyati restriktsiya mexanizmlarini o'rganish genetik tadqiqotlarni ancha soddalashtirdi. restriktsiyalash genetik materialni mayda bo'laklarga bo'lish imkonini berdi fizik usullar (agaroza gelidagi elektroforez) yordamida mazkur bo'laklarni o'lchamiga qarab ajratish, so'ngra har birini restriktsiya xaritalarini tuzish orqali alohida o'rganish mumkin bo'ldi. dnk ni restriktsiyalash genetik injeneriyaning asosi bo'lib, olib borilayotgan genetik tadqiqotlarda keng qo'llaniladi. molekulyar klonlash molekulyar klonlash - dnk bo'laklarini vektorlar yordamida ko'paytirish usuli bo'lib, quyidagi bosqichlarni o'z ichiga oladi: donor organizmdan dnk ni ajratish; ajratilgan dnk ni restriktaza yordamida yopishqoq uch hosil qilib kesish orqali fragmentlarga bo'lish; vektor molekulasini restriktaza fermenti bilan kesish orqali, yopishqoq uchli ochiq holatga o'tkazish; vektor molekula va kerakli dnk bo'lagini ligaza fermenti bilan tikish orqali rekombinant dnk hosil qilish; rekombinant dnk ni hujayraga kiritish orqali transgen hujayra hosil qilish; transformirlangan hujayrani tanlab olish; ushbu …
4 / 37
erlar ketma-ketligida matn ko'rinishida namoyon bo'ladi. sekvenslashning edman va senger usullari bo'lib, ulardan senger metodi keng qo'llaniladi. dnk ni sekvenslashdan oldin o'qilishi kerak bo'lgan uchastkasi pzr (amplifikator) da amplifikatsiyalanadi. dnk sekvenslanishi- dnk molekulasidagi nukleotidlar ketma-ketligini qurishga imkon beruvchi metodning umumiy nomlanishi. hozirgi vaqtgacha to'liq dnk molekulasi ustida ishlaydigan biror sekvenslash metodi yaratilmagan, ya'ni sekvenatorlar quyidagicha ishlaydi: dastlab dnk ning uncha katta bo'lmagan uchastkalari ko'p miqdorda tayyorlanadi (dnk ni sekvenslashdan oldin o'qilishi kerak bo'lgan uchastkasi ptsr da amplifikatsiyalanadi, ya'ni kerakli gen klonlanadi), so'ngra esa har bir uchastka alohida o'qiladi. 1-orqada qolgan zanjir (zahira ip), 2- boshqaruvchi zanjir (lider ip), 3- dnk polimeraza1, 4-dnk-ligaza, 5- rnk-praymer, 6-praymaza, 7- okazaki fragmenti, 8- dnk polimeraza2, 9- xelikaza, 10- bir zanjirli dnk ga bog'lanuvchi oqsillar, 11-topoizomeraza genetik materiallar (dnk va rnk)da qanday nukleotidlar borligini va tartibini aniqlashda dastlabki sekvenslash ishlarida: asosiy muammolar genomlar juda katta hajmga ega (odatda million yoki milliard asos juftligiga teng). hozirgi …
5 / 37
rta ishga tushirib, o'nlab genomlarning ketma-ketligini birvarakayiga aniqlash imkonini berdi. bugungi kunda nuklein kislotalarni sekvenslashning bir nechta usullari ishlab chiqilgan. ulardan eng ommabop va ishonchlisi bu- singer metodi bo'lib, 1000 juft asosgacha bo'lgan nukleotidlarni “o'qishga” imkon beradi, hamda genomning /genlarning uncha katta bo'lmagan fragmentlari uchun yoki so'nggi zamonaviy avlod (next-generation sequencing, ngs) sekvenirlari natijalarini tasdiqlash uchun ishlatiladi. e'tiboringiz uchun raxmat!!!

Want to read more?

Download all 37 pages for free via Telegram.

To'liq yuklab olish

About "genomika metodlari"

principe de la pcr biologiya yo'nalishi talabalari uchun “genomika” fanidan “genomika metodlari” mavzusidagi dars taqdimoti genomning dnk darajasidagi tahlili 1. polimer zanjir reaktsiyasi (pzr) 2. elektroforez 3. restriktsiyalash 4. molekulyar klonlash 5. sekvenslash polimer zanjir reaktsiyasi (pzr) biologik material yoki namunadagi kam kontsentratsiyali ma'lum bir dnk fragmentlarining ortishiga imkon beruvchi molekulyar biologiyadagi ekspremental usuldir; dnk polimeraza va teskari transkriptsiya fermentlari ishtirokida dnk bo'laklarining sezilarli darajada ortishiga imkon yaratadi; genomika va biologik tibbiyotda keng qo'llaniladi; 1983 yilda amerikalik bioximik keri myullis tomonidan kashf qilingan; pzr amplifikator asbobi yordamida amalga oshiriladi. ptsr texnologiyasi bu- qisqa vaqt i...

This file contains 37 pages in PPT format (5,9 MB). To download "genomika metodlari", click the Telegram button on the left.

Tags: genomika metodlari PPT 37 pages Free download Telegram