plazmid dnk siniajratish

PPTX 17 стр. 150,8 КБ Бесплатная загрузка

17 стр.

FaylHub.uz

Скачать через Telegram

Размер 150,8 КБ

Тип файла PPTX

Страницы 17

Обновлено Дек 2025

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇

1 / 17

dnk ni ajratish dnk ni ajratish plazmid dnk sini ajratib olish usullari plazmida dnk sini ajratish uchun ko’p usullardan foydalanishadi. ularning barchasi 3 ta asosiy bosqichni o’z ichiga oladi: bakteriyalarning o’sishi va plazmidalar amplifikatsiyasi; bakteriyalarni yig’ish va ularni lizis qilish; plazmida dnk sini tozalash. barcha tozalash usullarida bakteriya va plazmida dnk sidagi farqlardan foydalanishadi: 1.e.coli bakteriyasining xromosomasi odatda vektor sifatida ishlayladigan plazmida dnk sidan katta bo’ladi. 2.e.coli dnk sining asosiy massasi hujayradan fragmentlashgan chiziqli molekula shaklida ajratib olinsa, plazmida dnk si esa halqali kovalent bog’langan holatda ekstraksiyalanadi. shuning uchun ko’pchilik tozalash usullari e.coli lizirlangan hujayralari dnk sini uzun zanjirlarini cho’ktirishy o’li bilan ajratish ishlatiladi. bu usullar yopiq halqali dnk xususiyatlarini qo’llashga asoslangan. plazmida dnk sining har bir komplementar zanjiri yopiq kovalent bog’langan halqadan iborat bo’lib, ularni ajratish juda qiyin. oddiy holda dnk ni qizdirish va ph 12.5 gacha bo’lgan meyoriy ishqoriy eritmalarda dnk ko’plab vodorod bog’larini uzilishi kuzatiladi. e.coli dnksi …

2 / 17

molekulyar og’irligi ortishi bilan xo’jayin dnk xossalariga yaqin bo’ladi. 25 kb dan ortiq bo’lgan o’lchamga ega bo’lgan plazmidalarni ajratish ancha qiyinlashadi va toza chiqishi pasayadi. kam miqdordagi plazmida dnksini tezkor ajratish. oxirgi vaqtlarda bakteriyaning alohida koloniyasidan olingan kam hajmdagi plazmida dnksini ajratish usullari yaratilgan. ayrimlari ko’p mehnat talab qiladi, boshqalari qiyinchilik bilan amalga oshiriladi, uchinchilari esa e.colining ayrim shtammlari uchun yaroqlidir. biologik materialdan nuklein kislotalarni ajratish uchun hujayralar lizisi, hujayra nukleazalarining inaktivatsiyasi hamda qidirilayotgan nuklein kislotalarini hujayra massasidan ajratish kerak bo`ladi. odatda lizisning dastlabki materialni o`zgartira oladigan darajada qattiq va dastlabki materialni o`zgarmas holda saqlanishiga yordam berishi lozim. odatdagi lizis amali quyidagi bosqichlarni o`z ichiga mexanik buzish (masalan, gomogenizatsiya, gipotonik lizis) kimyoviy ishlash (masalan, detergent, xaotrop agentlar yordamidagi lizis, yoki tiolli tiklanish) oqsillarni fermentativ parchalanishi (masalan, proteinkinaza k yordamida) hujayra membranalarini buzilishi va hujayra ichi nukleazalarini inaktivatsiyasi bir vaqtda amalga oshirilishi mumkin. misol uchun bitta eritma hujayra membranasi uchun detergent …

3 / 17

o’stirilgan kulturadan foydalaniladi. agar plazmid vektorlar hujayrada replikatsiya bo’lib nusxalansalar, ularni kulturadan ko’p miqdorda ajratib olish mumkin. ularni suyuq ozuqa muhitida 18 soat qoldirib, keyin ajratib olish mumkin ishlatilayotgan vektor nazoratsiz replikatsiyalansa, uni bir soatga xloram-fenikolli muhitda inkubatsiya qilinadi. xloramfenikol xo’jayin hujayrada oqsil sintezini ingibirlaydi va bakteriya xromosomasi replikatsiyasini buzadi. plazmid dnkni ajratib olishning ko’p usullari plazmidning kavalentli yopiq xalqali formasiga va bakteriya xramasomasiga nisbatan kichik hajmda bo’lishligiga asoslangan. bakteriya xujayrasi sentrifuga qilish orqali yig’iladi va hujayra devorini buzish uchun lizotsim va edta dan foydalaniladi. ulardan tashqari organik suyuqliklardan, isitishdan va ionsiz detergentlardan foydalanish mumkin hujayra bo’laklari va bakteriya xromosomasi lizisdan keyin sentrifuga qilish orqali yo’q qilinadi. xoh katta, xoh kichik hajmli kulturalar bilan ishlashda ishqoriy lizis metodi tashkil qilingan. ishqoriy muhitda ifloslangan plazmid dnksi, rnk va oqsillar, xromosoma dnk oqsillari cho’kmaga tushadi. bu usulda olingan plazmid dnk restriksion endonukleazalar bilan qayta ishlashda va keyinchalik klonlashda yetarlicha toza hisoblanadi. ajratib …

4 / 17

a o’zgarishsiz avvalgi holatida qoladi. endi plazmid dnkni sentrifuga qilib, ajratib olish mumkin. image2.jpeg nlonhaa ounuctkka alhk cg ge) am3uc fe knetok is u pa3pywehhbie ketku - ocaaok occtatkob hk, 6enku, k/ieetok “amnuabi hk 6 pactbope ocakgehne 6enkos 6enkn u aunugpl ocakaehue qhk cnuptom /docprops/thumbnail.jpeg dnk ni ajratish

5 / 17

Хотите читать дальше?

Скачайте все 17 страниц бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "plazmid dnk siniajratish"

dnk ni ajratish dnk ni ajratish plazmid dnk sini ajratib olish usullari plazmida dnk sini ajratish uchun ko’p usullardan foydalanishadi. ularning barchasi 3 ta asosiy bosqichni o’z ichiga oladi: bakteriyalarning o’sishi va plazmidalar amplifikatsiyasi; bakteriyalarni yig’ish va ularni lizis qilish; plazmida dnk sini tozalash. barcha tozalash usullarida bakteriya va plazmida dnk sidagi farqlardan foydalanishadi: 1.e.coli bakteriyasining xromosomasi odatda vektor sifatida ishlayladigan plazmida dnk sidan katta bo’ladi. 2.e.coli dnk sining asosiy massasi hujayradan fragmentlashgan chiziqli molekula shaklida ajratib olinsa, plazmida dnk si esa halqali kovalent bog’langan holatda ekstraksiyalanadi. shuning uchun ko’pchilik tozalash usullari e.coli lizirlangan hujayralari dnk sini uzun zanjirlar...

Этот файл содержит 17 стр. в формате PPTX (150,8 КБ). Чтобы скачать "plazmid dnk siniajratish", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: plazmid dnk siniajratish PPTX 17 стр. Бесплатная загрузка Telegram