laboratoriya mashg‘ulotlari

PPTX 8 стр. 84,1 КБ Бесплатная загрузка

8 стр.

FaylHub.uz

Скачать через Telegram

Размер 84,1 КБ

Тип файла PPTX

Страницы 8

Обновлено Дек 2025

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇

1 / 8

6-laboratoriya mashg‘ulotlari mavzu: turli metodlar yordamida o‘simlik to‘qimalaridan genom dnk ajratish 6-laboratoriya mashg‘ulotlari mavzu: turli metodlar yordamida o‘simlik to‘qimalaridan genom dnk ajratish ishdan maqsad: turli metodlar yordamida o‘simlik to‘qimalaridan genom dnk tartibini o‘rganish ish uchun zarur jihozlar: mikrotsentrifuga, vorteks, sentrifuga, dnk ajratish uchun kerak barcha reaktivlar, eritmalar nazariy tushuncha: nuklein kislotalar aralashmasidan oqsillarni yo‘qotish uchun qo‘llaniladigan standart usullardan biri dastlab fenol bilan, so‘ngra fenol-xloroform (1:1) aralashmasi bilan ishlov berish hisoblanadi. shuni ta’kidlab o‘tish joizki, “xloroform” eritmasi deyilganda, xloroform va izoamil spirtining 24:1 hajmiy nisbatdagi aralashmasi nazarda tutiladi. xloroform oqsillarni denaturatsiyalaydi, izoamil spirti esa suvli va organik fazani aniq ajralishini ta’minlaydi. fenol va xloroformning zichligi suvning zichligidan farq qilganligi sababli fenol va xloroform qo‘shilgan lizat hujayrasini sentrifuga qilganda alohida 2 ta qatlam hosil bo‘ladi. pastki qatlam - organik aralashmadan tashkil topgan eritma, ustki qatlam - suvli eritmadan tashkil topgan. bu holatda oqsil denaturatsiyaga uchraydi va peritsipitat hosil qiladi. u suvli va …

2 / 8

ubatsiyalanadi; 5. 500 µl fenol/ xloroform/ izoamil spirti (25:24:1) eritmalari chayqatilgan holda qo‘shiladi. dastlab sut rangli aralashma hosil bo‘ladi; 6. sentrifugada 18.000 ayl/daq 5 daq. tsentrifuga qilinadi; 7. ustki suvli faza yangi probirkaga olinadi; 8. fenol/ xloroform/ izoamil spirti (25:24:1) eritmalari bilan ekstraksiya qilish interfaza tiniq holatga kelgunicha takrorlanadi (p:5,6,7); 9. supernatant (=300-450 µl) olib tashlanadi va ustiga 2-2,5 marta ko‘proq hajmdagi sovutilgan 96 % li etanol eritmasi qo‘shiladi; 10. 1-2 soatga -20˚c ga qoldiriladi; 11. 30 sek. 15000 ayl/daq. da tsentrifugalanadi; 12.cho‘kmaga 70 % li etanol qo‘shiladi va aralashtiriladi; 13.spirt to‘kib yuboriladi va 12-jarayon takrorlanadi; 14.vakumli tsentrifugada quritiladi; 15.50 µl dein. suv yoki tye buferda eritiladi; 16. ajratib olingan dnk ni “pzr” da miqdor va sifat jihatdan aniqlanadi. 17. dnk eritmasini +4˚c da 3 haftagacha saqlash, yoki, -20˚c da bir necha oygacha saqlash mumkin (maniatis, 1984). 2.usul. guscn + sio2 li metod yordamida dnk ni ajratib olish sorbsiyali ekstraksiya …

3 / 8

ya bosqichlaridan so‘ng tsentrifugalash jarayoni ketadi, bunda silikagel va nk cho‘kma hosil qiladi. supernatant to‘kib tashlanadi. keyin 1-3 martagacha 70 % li etanol bilan yuvib tashlanadi. spirtli yuvishlar xaotrop tuz qoldiqlarini to‘liq yo‘qotish uchun zarur. tugallanish bosqichida, nk ni silikageldan ajralishi past ion kuchli eritmada sodir bo‘ladi. rn 8-9 da dnk oson ajraladi va butunligini saqlab qoladi (melzac, 1996). sio2 eritmasini tayyorlash: 60 gr sio2 500 ml d h2o tayyorlanishi: probirkaga solib aralashtiramiz, 24 soat xona haroratida qoldiramiz. 430 ml suyuqlikni so‘rib olish orqali to‘kib tashlaymiz. qayta suspenziyalaymiz, ya’ni, 500 ml d h2o ni energetik aralashtirgan holda solamiz. xona haroratida 5 soat qoldiramiz. 440 ml suyuqlikni so‘rib olish orqali to‘kib tashlaymiz. qolgan cho‘kmaga 600 µl kons. hcl quyamiz, 2,0 ga yetguncha. alikvotni 4 ml dan qilib bir nechta probirkaga solib chiqamiz. avtoklavlaymiz. xona haroratida 6 oygacha saqlanadi. ishning borishi: 1.1,5 ml li mikrotsentrifugaga mo‘ljallangan probirkaga 900 µl l6 va 40 …

4 / 8

in ouenine at on pe ishdan magsad: turli metodlar yordamids ‘o'similikto'gimalaridan genom dnk tartbini co'rganish ish uchun zarurjihoxlar: mikrotsentrfugs, vorteks,sentrifuge, dnk ajratish uchun karak barche reaktivar, eritmalar

5 / 8

Хотите читать дальше?

Скачайте все 8 страниц бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "laboratoriya mashg‘ulotlari"

6-laboratoriya mashg‘ulotlari mavzu: turli metodlar yordamida o‘simlik to‘qimalaridan genom dnk ajratish 6-laboratoriya mashg‘ulotlari mavzu: turli metodlar yordamida o‘simlik to‘qimalaridan genom dnk ajratish ishdan maqsad: turli metodlar yordamida o‘simlik to‘qimalaridan genom dnk tartibini o‘rganish ish uchun zarur jihozlar: mikrotsentrifuga, vorteks, sentrifuga, dnk ajratish uchun kerak barcha reaktivlar, eritmalar nazariy tushuncha: nuklein kislotalar aralashmasidan oqsillarni yo‘qotish uchun qo‘llaniladigan standart usullardan biri dastlab fenol bilan, so‘ngra fenol-xloroform (1:1) aralashmasi bilan ishlov berish hisoblanadi. shuni ta’kidlab o‘tish joizki, “xloroform” eritmasi deyilganda, xloroform va izoamil spirtining 24:1 hajmiy nisbatdagi aralashmasi nazarda tutiladi. xloroform o...

Этот файл содержит 8 стр. в формате PPTX (84,1 КБ). Чтобы скачать "laboratoriya mashg‘ulotlari", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: laboratoriya mashg‘ulotlari PPTX 8 стр. Бесплатная загрузка Telegram