dnkajratish uchun gel-elektroforez usullarini bajarishda ishlatiladigan eritmalarni tayyorlash

PPTX 15 стр. 723,5 КБ Бесплатная загрузка

15 стр.

FaylHub.uz

Скачать через Telegram

Размер 723,5 КБ

Тип файла PPTX

Страницы 15

Обновлено Дек 2025

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇

1 / 15

mavzu: mavzu: dnk ajratish uchun gel-lektroforez usullarini bajarishda ishlatiladigan eritmalarni tayyorlash reja: 1. dnk ajratishda elektroforez usulining qo’llanilishi 2. agaroz yoki poliakrilamid geli eritmalari tayyorlash 3. elekroforez jarayonida eritmalardan foydalanish 4. dnkni gel-elektroforez natijalarini vizualizatsiya qilish 5. xulosa 1. dnk fragmentlarini ajratish va tahlil qilish elektroforez dnk molekulalarini ularning uzunligiga qarab ajratish uchun ishlatiladi. bu usul pcr (polimeraza zanjir reaktsiyasi) yoki restriksiya fermentlari yordamida bo‘lingan dnk fragmentlarini vizualizatsiya qilish uchun qo‘llanadi. 2. genetik analiz va diagnostika elektroforez genetik kasalliklarni aniqlashda, genetik mutatsiyalarni tahlil qilishda ham muhim rol o‘ynaydi. masalan, dnkning mikrosatellit markerlari yoki snp (yagona nukleotid polimorfizmi) aniqlashda ishlatiladi. 3. dnkni klonlash va molekulyar klonlash jarayonlari genetik muhandislikda elektroforez dnk plazmidlari va pcr mahsulotlarini ajratish va tekshirish uchun ishlatiladi. dnk fragmentlari elektroforez orqali ajratilgandan so‘ng, kerakli bo‘laklarni kesib olib, vektorlar bilan klonlash mumkin. 4. kriminalistika va sud ekspertizasi elektroforez dnk barmaq izlarini aniqlash uchun sud ekspertizasida keng qo‘llaniladi. str (short …

2 / 15

ini baholash va turli holatlarda genlarning faoliyatini o‘rganish mumkin. bu usul biotexnologiya, tibbiyot, sud ekspertizasi va fundamental biologik tadqiqotlar uchun muhim ahamiyatga ega. elektroforez uchun ishlatiladigan gel eritmalari dnk yoki oqsillarni ajratish maqsadida tayyorlanadi. dnk ajratish uchun agaroz geli, oqsillarni ajratish uchun esa poliakrilamid geli keng qo‘llaniladi. 1. agaroz geli tayyorlash agaroz geli dnk va rnk fragmentlarini ajratish uchun ishlatiladi. kerakli reagentlar: agaroz kukuni elektroforez bufferi (tae yoki tbe) etidium bromid (etbr) yoki boshqa dnk bo‘yovchi modda distillangan suv tayyorlash bosqichlari: 1. konsentratsiyani aniqlash dnk fragmentlarining o‘lchamiga qarab agaroz foizi tanlanadi: 0.5% – 1% → katta dnk fragmentlari (> 1 kb) uchun 1.5% – 2% → o‘rta dnk fragmentlari (500–1000 bp) uchun 2% – 3% → kichik dnk fragmentlari ( 100 kda) uchun 10% → o‘rtacha oqsillar (50–100 kda) uchun 12% – 15% → kichik oqsillar (< 50 kda) uchun 2. resolving (ajratish) geli tayyorlash masalan, 10% resolving geli tayyorlash …

3 / 15

natijalarni o‘qish. quyida elektroforezda ishlatiladigan eritmalar va ularning qo‘llanilishi keltirilgan. 1. gel tayyorlash eritmalari bu eritmalar dnk yoki oqsillarni ajratish uchun gel tayyorlashda ishlatiladi. agaroz geli (dnk va rnk uchun) dnk fragmentlari hajmiga qarab 0.5% – 3% konsentratsiyada tayyorlanadi. tae yoki tbe bufferda eritilib, mikroto‘lqinli pech yoki suv hammomida eritiladi. poliakrilamid geli (oqsil va kichik dnk fragmentlari uchun) akrilamid va bis-akrilamid aralashmasidan tayyorlanadi. ajratish (resolving) geli va yig‘uvchi (stacking) geli ishlatiladi. qotish jarayoni aps va temed yordamida katalizlanadi. 2. elektroforez bufferlari elektroforez davomida dnk yoki oqsillarni to‘g‘ri harakatlantirish va ionli muhit yaratish uchun ishlatiladi. tae buffer (tris-asetat-edta) dnk elektroforezida keng qo‘llaniladi. past ionli kuchlanish tufayli uzoq masofada ajratish uchun mos. kam zaryad to‘planadi, bu esa uzoq vaqt davomida ishlatish imkonini beradi. tbe buffer (tris-borat-edta) yuqori ionli kuchlanishga ega bo‘lib, kichik dnk fragmentlari uchun yaxshi. dnkni aniqroq ajratish uchun mos keladi, lekin uzoq muddatli elektroforezda issiqlik hosil bo‘lishi mumkin. sds-page uchun …

4 / 15

. dnk yoki oqsillarni bo‘yash eritmalari elektroforezdan so‘ng gelni bo‘yash uchun ishlatiladi. etidium bromid (etbr) dnkni uv nurlari ostida yoritish imkonini beradi. mutagen modda bo‘lgani uchun ehtiyotkorlik bilan ishlatilishi kerak. glitserin yoki sakkarozadan iborat bo‘lib, namunani quduqqa cho‘ktirishga yordam beradi. bromfenol ko‘k yoki ksilen sianol kabi bo‘yoqlar elektroforez jarayonini kuzatish uchun ishlatiladi. sds-page uchun yuklash bufferi oqsillarni denaturatsiya qilish va ularning zaryadini tenglashtirish uchun ishlatiladi. sds, beta-merkaptoetanol yoki dtt oqsillarni denaturatsiya qiladi. 4. dnk yoki oqsillarni bo‘yash eritmalari elektroforezdan so‘ng gelni bo‘yash uchun ishlatiladi. etidium bromid (etbr) dnkni uv nurlari ostida yoritish imkonini beradi. mutagen modda bo‘lgani uchun ehtiyotkorlik bilan ishlatilishi kerak. sybr green yoki sybr safe etbr ga nisbatan xavfsizroq bo‘lib, uv yoki ko‘k yorug‘lik ostida ko‘rinadi. coomassie brilliant blue (oqsillar uchun) sds-page elektroforezidan so‘ng oqsillarni bo‘yash uchun ishlatiladi. kumush bo‘yash juda sezgir bo‘lib, past konsentratsiyadagi oqsillarni aniqlash imkonini beradi. 5. gelni vizualizatsiya qilish eritmalari elektroforez natijalarini aniqlash va …

5 / 15

gelga qo‘shiladi, bu esa elektroforez tugashi bilan natijalarni bevosita ko‘rish imkonini beradi. etidium bromid (etbr) eng keng tarqalgan dnk bo‘yoqlaridan biri. dnk bilan bog‘lanib, uv nurlari ostida yorqin to‘q sariq flüoresan hosil qiladi. mutagen bo‘lgani sababli ehtiyotkorlik bilan ishlatish kerak. sybr green yoki sybr safe etbr ga nisbatan xavfsizroq bo‘lib, uv yoki ko‘k yorug‘lik ostida ko‘rinadi. dnkni aniqlash sezgirligi yuqori. b) elektroforezdan keyin bo‘yash ba’zi bo‘yoqlar elektroforezdan keyin ishlatiladi. gel dnk bo‘yoq eritmasiga botiriladi va ma’lum vaqt davomida bo‘yaladi. metilen ko‘k . xavfsiz bo‘lib, uv nurlari talab qilinmaydi. kam sezgir bo‘lib, faqat katta miqdordagi dnkni aniqlash mumkin. kumush bo‘yash juda sezgir bo‘lib, oz miqdordagi dnkni ham aniqlash imkonini beradi. jarayon uzoq davom etadi. 2. dnkni vizualizatsiya qilish uskunalari bo‘yoq qo‘llanilganidan so‘ng, dnkni aniqlash uchun maxsus asbob-uskunalar ishlatiladi. uv transilluminator etbr va sybr green kabi flüoresan bo‘yoqlarni ko‘rish uchun ishlatiladi. dnkning joylashishi va zichligini aniqlashga yordam beradi. ko‘k yorug‘lik transilluminatori sybr …

Хотите читать дальше?

Скачайте все 15 страниц бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "dnkajratish uchun gel-elektroforez usullarini bajarishda ishlatiladigan eritmalarni tayyorlash"

mavzu: mavzu: dnk ajratish uchun gel-lektroforez usullarini bajarishda ishlatiladigan eritmalarni tayyorlash reja: 1. dnk ajratishda elektroforez usulining qo’llanilishi 2. agaroz yoki poliakrilamid geli eritmalari tayyorlash 3. elekroforez jarayonida eritmalardan foydalanish 4. dnkni gel-elektroforez natijalarini vizualizatsiya qilish 5. xulosa 1. dnk fragmentlarini ajratish va tahlil qilish elektroforez dnk molekulalarini ularning uzunligiga qarab ajratish uchun ishlatiladi. bu usul pcr (polimeraza zanjir reaktsiyasi) yoki restriksiya fermentlari yordamida bo‘lingan dnk fragmentlarini vizualizatsiya qilish uchun qo‘llanadi. 2. genetik analiz va diagnostika elektroforez genetik kasalliklarni aniqlashda, genetik mutatsiyalarni tahlil qilishda ham muhim rol o‘ynaydi. masalan, dnkning mikros...

Этот файл содержит 15 стр. в формате PPTX (723,5 КБ). Чтобы скачать "dnkajratish uchun gel-elektroforez usullarini bajarishda ishlatiladigan eritmalarni tayyorlash", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: dnkajratish uchun gel-elektrofo… PPTX 15 стр. Бесплатная загрузка Telegram