oqsillarning gel-elektroforezi

DOCX 6 sahifa 311,7 KB Bepul yuklash

6 sahifa

FaylHub.uz

Telegram orqali yuklab olish

Hajm 311,7 KB

Fayl turi DOCX

Sahifalar 6

Yangilangan Dek 2025

Sahifa ko'rinishi (5 sahifa)

Pastga aylantiring 👇

1 / 6

oqsillarning gel-elektroforezi pag elektroforez keng qo‗llaniladigan usul hisoblanadi. tashuvchi muhit sifatida akrilamid va metilenbisakrilamid sopolimerlari qo‗llaniladi. monomerlarning uzun poliakrilamid zanjiri ma‘lum joylarida metilen ko‗prigi yordamida o‗zaro birikishi xisobiga eleksimon teshiklar hosil qiladi. bir —biridan bir xil uzoqlikda joylashgan amid gruppalari bu strukturaning yuqori gidrofilligini ta‘minlaydi. akrilamidning polimerlanish temed (tetrametiletilendiamin) indikatori, persulfat katalizatori yordamida yoki riboflavin ishtirokidagi fotokataliz hisobiga boradi. o‗zining elaksimon strukturasi tufayli pag molekulyar elak vazifasini ham o‗taydi. gelning qovushqoqligi, chidamliligi, elastikligi va teshiklarning o‗lchami poliakrilamidning polimerlanish darajasiga, ya‘ni n, n — bisakrilamid soniga bog‗liq. gelning g‗ovaklik darajasini polimerlanish vaqtida eritmadagi akrilamidning konsentratsiyasi belgilaydi. akrilamid va biriktiruvchi monomer— n, n — metilenbisakrilamidning nisbati 40:1 (og‗irligiga ko‗ra) ni tashkil yetadi. demak akrilamidning to‗g‗ri keladigan konsentratsiyasini tanlab, kerakli o‗lchovdagi g‗ovakli gelni hosil qilish mumkin. yuqori malekulali oqsillarni (100000 va undan ortiq) ajratishda 7% li akrilamiddan foydalaniladi (g‗ovak diametri 50 a). kichik molekulali oqsillarni ajratish uchun kichik g‗ovakli gel ishlatiladi (15% va …

2 / 6

dir bo‗lishi xisobiga vaqtning tejalishini va aniq natijalar olish imkoniyatini berishini hisobga olgan holda disk—elektroforezning mohiyati va ishni olib borish tartibi haqida batafsil to‗xtalib o‗tamiz. disk-elektroforez bu uslubda oqsillarning elektr maydonida harkatlanishi va fraksiyalarga ajrashi pag bilan to‗lg‗azilgan silindrsimon shisha naychalarda amalga oshiriladi. kolonkada oqsil fraksiyalari disk ko‗rinishida ajraladi, shu sababli disk— elektroforez deb nomlangan. asbobning tuzilishi. disk — elektroforez o‗tkaziladigan asboboning asosiy qismi yuqori (1 rasm) va pastki idishdan, gel to‗ldiriladigan shisha naychalardan (1—rasm) iborat. yuqori va pastki idishga platina simli yoki ko‗mir plastikali elektrod (1— rasm) o‗rnatilgan. ikkala idish o‗rtasida gel to‗ldiriltan shisha naychalar vertikal holatda joylashadi. yuqorigi idishning tubida bir xil uzoqlikda joylashgan teshiklar bo‗lib, mahkamlovchi xalqa (1—rasm) yordamida gelli naycha biriktiriladi. shisha naychaning ichki diametri 5 mm, tashqi diametri 7 mm, naycha uzunligi 65 — 70 mm. naychaning ichki yuzasi bir tekis bo‗lishi lozim, aks holda oqsillar aniq fraksiyalarga ajralmaydi va gelni shishadan ajratib olish qiyinlashadi. …

3 / 6

riboflavin, saharoza, ammoniy persulfat, glitsin yoki (alanin), bromfenol ko‗ki (metilen yashili), toza sirka kislotasi, kon kerak bo‗ladi. eritma tayyorlash. gel tayyorlash uchun asosiy eritmalar. nordon oqsillar uchun: a ishqoriy eritma: (rn8,9) 48,0 ml i n ns1 36,6 g tris 0,23 ml- temed 100 ml gacha distillangan suv bilan keltiriladi; 48,0 ml i n ns1 5,98 g tris 0,46 ml temed 100 ml gacha distillangan suv solinadi; 28,0 g akrilamid 0,75 g bis 100 ml gacha distillangan suv solinadi; 10 g akrilamid 2,6 g bis 100 ml gacha distillangan suv solinadi; 400 mg riboflavin 100 ml gacha distillangan suv solinadi; 40 g saharoza 100 ml gacha distillangan suv solinadi; 0,14 g ammoniy persulfat 100 ml gacha distillangan suv solinadi; 6,0 g tris 28,8g glitsin 1000,0 ml gacha distillangan suv solinadi. ishlatishdan avval 10 marta suyultirilishi lozim! indikator — bo‗yovchi eritma; 0,001 g bromfenol ko‗ki 100 ml gacha distillangan suv solinadi. fiksirlovchi …

4 / 6

ritmalar ishqoriy oqsillar uchun berilganidek qilib tayyorlanadi. «k» eritmadan tashqari barcha eritmalarni muzlatkichda saqlash mumkin. «k» eritma bevosita ishlitishdan oldin tayyorlanadi. ishning borishi: 1. muzlatkichda saqlangan eritmalar xona haroratiga keltirildi. 2. shisha naychalar gelni polimerlash uchun mo‗ljallangan shtativga o‗rnatiladi. 3. pastki gel manomerini tayyorlash uchun asosiy eritma quyidagi nisbatda olinadi: 1 hajm a eritma 2 hajm s eritma 1 hajm dist. suv 4 hajm k eritma vakuum nasos yordamida eritma havosi tortib olinadi, aks holda eritma tarkibidagi havo gelni mo‗rtlashtiradi va polimerlanish jarayoni bir tekis bormaydi. eritmalar yuqoridagi nisbatda olinganda ishqoriy muhit uchun 7%-li (rn 8,9), nordon muhit uchun 15%-li (rn 4,3) gel hosil bo‗ladi. 4. shisha naychalarga 1,2—1,5 ml ajratuvchi gel monomer eritmasidan quyiladi. gelning sirti tekis qotishi uchun monomer eritma ustiga 0,1 — 0,2 ml distillangan suv extiyotlik bilan shisha naycha devori orqali quyiladi, bunda monomer va distillangan suv ajralib ketmasligi kerak. 5. polimerlanish 30 minut davom yetadi. …

5 / 6

mida olib tashlanadi. 10. oqsil eritmasini tayyorlash. oqsil eritmasi buferga diffuziyalanib ketmasligini ta‘minlash uchun, ajratilmoqchi bo‗lgan oqsilni 8 marta suyultirilgan a eritmasida eritiladi. oson diffuziyalanadigan, molekulyar og‗irligi kichik bo‗lgan oqsillarni saharoza eritmasida eritiladi. 11. shisha naycha asbobga o‗rnatilib gel ustiga 0,10 — 0,25 ml oqsil eritmasi quyiladi. naychaning bo‗sh qolgan qismi elektrod buferi yordamida, oqsil eritma bilan aralashib ketmasligini ta‘minlagan holda to‗ldiriladi. 12. pastki idishga — 4° s gacha sovutilgan bufer eritma solib, yuqori va pastki idishlar birlashtiriladi. yuqoridagi idishga ham extiyotlik bilan sovuq bufer va 1—2 ml indikator bo‗yog‗i qo‗shiladi. asbob muzlatkichga o‗rnatiladi va polyarligi bo‗yicha tok manbaiga ulanadi. dastlabki yarim soatda har bir shisha naychaga 2 ma-dan tok kuchi berilishi kerak. bu vaqtda elektrokimyoviy konsentrlanish jarayoni boradi, agar birdaniga katta tok kuchi berilsa issiqlik ta‘sirida broun harakati kuchayib, oqsil bufer eritmaga chiqib ketishi mumkin. oqsil molekulalari konsentrlovchi geldan o‗tib ajratuvchi gel chegarasi etib kelganda, tok kuchi har bir …

Ko'proq o'qimoqchimisiz?

Barcha 6 sahifani Telegram orqali bepul yuklab oling.

To'liq faylni yuklab olish

"oqsillarning gel-elektroforezi" haqida

oqsillarning gel-elektroforezi pag elektroforez keng qo‗llaniladigan usul hisoblanadi. tashuvchi muhit sifatida akrilamid va metilenbisakrilamid sopolimerlari qo‗llaniladi. monomerlarning uzun poliakrilamid zanjiri ma‘lum joylarida metilen ko‗prigi yordamida o‗zaro birikishi xisobiga eleksimon teshiklar hosil qiladi. bir —biridan bir xil uzoqlikda joylashgan amid gruppalari bu strukturaning yuqori gidrofilligini ta‘minlaydi. akrilamidning polimerlanish temed (tetrametiletilendiamin) indikatori, persulfat katalizatori yordamida yoki riboflavin ishtirokidagi fotokataliz hisobiga boradi. o‗zining elaksimon strukturasi tufayli pag molekulyar elak vazifasini ham o‗taydi. gelning qovushqoqligi, chidamliligi, elastikligi va teshiklarning o‗lchami poliakrilamidning polimerlanish darajasiga, ya‘ni ...

Bu fayl DOCX formatida 6 sahifadan iborat (311,7 KB). "oqsillarning gel-elektroforezi"ni yuklab olish uchun chap tomondagi Telegram tugmasini bosing.

Teglar: oqsillarning gel-elektroforezi DOCX 6 sahifa Bepul yuklash Telegram