gibrid va gibridoma

PPTX 960,9 КБ Бесплатная загрузка

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇

1724744420.pptx /docprops/thumbnail.jpeg gibrid va gibridoma gibrid va gibridoma план: 1.гибридомная технология ( rus tilida ) 2. gibridoma texnologiyasi - hybridoma technology 3.гибридома- балшая медицискя енсиклапедя 12 1 современная наука достигла такого этапа развития, когда для исследования необходимы реактивы, способные взаимодействовать с индивидуальными молекулами либо с различными участками макромолекул, что обеспечивает точность качественного и количественного анализа. этим критериям идеально соответствуют молекулы иммуноглобулинов. так как данные реагенты необходимы в большом количестве, перед исследователями была поставлена задача наладить производство антител одной специфичности (моноклональных) в промышленном масштабе. было предпринято множество попыток, из которых следует отметить методики получения моноклональных антител из опухолей лимфоидных тканей и производства поликлональных антисывороток. предложенные методы имели целый ряд недостатков и не удовлетворяли предъявляемым требованиям. было невозможно получить опухоли, синтезирующие антитела на интересующие исследователя антигены, а поликлональные антисыворотки обладали перекрестной реактивностью и содержали низкое количество моноклональных антител. в связи с этим революционным достижением послужила разработка методики получения лимфоидных гибридом, позволяющая получать …

существует более 50 тыс. гибридом. получены гибридомы на основе клеток мышей, крыс, золотистого и китайского хомячков, клеток человека и т.д. первоначально были получены гибридомы на основе клеток мыши линии balb/c, технология получения которых была разработана ранее. в настоящее время банк гибридом пополняется посредством получения гибридом на интересующие исследователей антигены. гибридомная технология на данном этапе является единственной технологией, позволяющей получать моноклональные антитела в необходимом количестве, и занимает ведущее место в коммерческом обороте продуктов биотехнологии. технология лимфоидных гибридом была разработана в 1975 году мильштейном и келлером, и уже к 1977 году ими было получено 16 типов гибридом, синтезирующих различные типы моноклональных антител. первоначально гибридомная технология строилась на основе следующих разработок: имелись линии миеломных клеток мышей balb/c (дефектные по некоторым ферментам метаболизма нуклеиновых кислот, что являлось необходимым условием для селекции получаемых гибридом), полученные в результате развития методов получения миелом, посредством введения инертного пластика и минеральных масел в виде подкожных инъекций мышам; разработаны методы …

ских затруднений, в частности это был окончательный и, вероятно, самый весомый довод в пользу клонально-селективной теории синтеза антител. гибридомная технология, в ее классическом варианте, выполняется в несколько этапов. в качестве предпосылок, необходимо иметь линию раковых клеток-носителей, дефектных по одному из ферментов (тимидинкиназе (тк) или гипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазе (ггфрт)), что само по себе определяет выбор способа селекции образующихся гибридом; разработанную процедуру слияния клеток; антиген, антитела на который необходимо получить исследователю, методики определения продуцируемых гибридомой антител с целью клонирования необходимой линии. при наличии всего вышеперечисленного процедура получения лимфоидных гибридом выглядит следующим образом (рис 1): иммунизация животных выбранным антигеном и выделение «нормальных» лимфоцитов иммунизируемого животного после определения максимального титра интересующих исследователя антител; культивирование раковых клеток-носителей; проведение слияния клеток-носителей с «нормальными» лимфоцитами (в классическом варианте с помощью полиэтиленгликоля); проведение процедуры селекции образующихся гибридом с помощью среды гат. клетки, имеющие дефект по одному из перечисленных ферментов (тк или ггфрт), не способны расти в гат среде, содержащей гипоксантин, …

ктов (из гипоксантина в данном случае), следовательно, в гат-среде данные клетки погибнут. в том случае, если произойдет слияние клеток таким образом, что у полученных гибридов дефектные ггфрт и тк будут дополнены функциональными ферментами, то данные гибриды выживут в гат-среде. к таким клеткам относятся гибридные клетки, получившие оба фермента от родительских клеток (по одному от каждой). при слиянии миеломных клеток с лимфоцитами можно использовать опухолевые клетки, дефектные только по одному из ферментов, т.к. лимфоциты не способны размножаться в культуре и погибают через некоторое время естественным путем (полуселективный способ) (рис 2); проведение процедуры культивирования полученных лимфоидных гибридом и выделение клона гибридом, продуцирующего необходимые антитела (выделение клона, продуцирующего нужные исследователю антитела необходимо, т. к. только в этом случае будет происходить наращивание концентрации гибридом данного типа); проведение изучения полученных гибридом; наращивание концентрации моноклональных антител in vivo (с помощью асцитных жидкостей) или in vitro. такова классическая схема получения лимфоидных гибридом, предложенная келлером и мильштейном. до …

еток l929; в связи с усовершенствованием методов электрослияния клеток происходит его активное внедрение в гибридомную технологию в качестве альтернативы слияния с помощью этиленгликоля, вытеснившего в свое время методику слияния с помощью вирусов (вирус сендай); в качестве клеток-носителей все чаще начинают использование клеток других типов, полученных либо от организма одного вида, либо даже от разных видов. разработка подобных методов позволяет не только изучить особенности функционирования клеток как таковых, но и имеет колоссальный практический интерес, т.к. позволяет решить проблему получения человеческих гибридом. одной из основных трудностей, возникающих при получении лимфоидных гибридом, является наличие феномена элиминации хромосом, заключающегося в потере определенных хромосом в процессе культивирования. данный процесс может служить причиной потери клеткой признаков, необходимых исследователю, в частности, потери способности к неограниченной пролиферации у раковых клеток и способности к синтезу иммуноглобулинов у гибридом. в данном процессе имеется корреляция между количеством хромосом и степенью их элиминации. чем больше хромосом в клетке, тем меньше вероятность потери …

Хотите читать дальше?

Скачайте полный файл бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "gibrid va gibridoma"

1724744420.pptx /docprops/thumbnail.jpeg gibrid va gibridoma gibrid va gibridoma план: 1.гибридомная технология ( rus tilida ) 2. gibridoma texnologiyasi - hybridoma technology 3.гибридома- балшая медицискя енсиклапедя 12 1 современная наука достигла такого этапа развития, когда для исследования необходимы реактивы, способные взаимодействовать с индивидуальными молекулами либо с различными участками макромолекул, что обеспечивает точность качественного и количественного анализа. этим критериям идеально соответствуют молекулы иммуноглобулинов. так как данные реагенты необходимы в большом количестве, перед исследователями была поставлена задача наладить производство антител одной специфичности (моноклональных) в промышленном масштабе. было предпринято множество попыток, из которых следует от...

Формат PPTX, 960,9 КБ. Чтобы скачать "gibrid va gibridoma", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: gibrid va gibridoma PPTX Бесплатная загрузка Telegram