komplementni bog’lash reaksiyasi

DOCX 76,9 KB Bepul yuklash

Sahifa ko'rinishi (5 sahifa)

Pastga aylantiring 👇
1
1734505535.docx komplementni bog’lash reaksiyasi reja: 1. komplementni bog’lash reaksiyasining mohiyati. 2. komplementni bog’lash reaksiyasining komponentlarini tayyorlash. komplementni bog’lash reaksiyasi (kbr) ko’plab yequmli kasalliklarga diagnoz qo’yishda qo’llaniladigan an’anaviy serologik reaksiyalardan biri hisoblanadi. reaksiyaning nomi alohida ikki bosqichdan iborat bo’lib bajariladigan ishning mohiyatini malum darajada ko’rsatadi. birinchi bosqichda antigen va antitelo qatnashadi (oldindan shulardan biri malum bo’ladi), hamda oldindan titrlangan malum miqdorda komplement kerak bo’ladi. antigen va antitelo kompleksining mos kelishi tufayli komplementni biriktirib oladi, buni esa, ikkinchi bosqichda indikator vazifasini o’tovchi (qo’chqor eritrotsitlarining aralashmasi va ularga antizardob-gemolizin) namoyon qiladi. agarda antigen va antitelo birikishi tufayli komplement bog’lansa, u holda eritrotsitlar lizisga uchramaydi (musbat kbr). manfiy kbr da esa boglanmagan komplement eritrotsitlarni gemolizlanishida ishtirok etadi. (1-rasm). 1-rasm. kbr ning tasviri. ag- tekshirilayotgan antigen; at - spetsifik antitelo; k- komplement; e- qo’chqorning eritrotsiti; g- gemolizin. gemolizning to’xtashi musbat- kbr (+) manfiy kbr - gemoliz (-) kbr dan amaliyotda ko’pincha diagnoz qo’yishda, virusni topish …
2
bilan ya’ni: atseton, freon, efir, xloroform va shunga o’xshash antigen va virus o’rnida ishlatiladigan to’qimaning turiga bog’liq holda tozalanadi. zardoblar esa antikomplementarlikdan qizdirish va komplementga boshqa usullar bilan ishlov berish yo’li bilan tozalanadi. kbr uchun antigenlar kasallik bilan zararlangan hayvonlarning organlaridan virus yuqtirilgan tovuq homilasining allantois yoki amnion suyuqligidan, hamda virus yuqqan hujayra kulturalarining suyuq muhitidan tayyorlanadi. virus infeksiyalarida kbr uchun antigen tayyorlash bakterial infeksiyalarnikiga qaraganda ko’p jihatdan farq qiladi. bu esa virusning bir qator spetsifik xususiyatlari bilan bog’liq. birinchidan, hujayra ichidan virus antigenini ajratish uchun ko’pchilik holda yuqumli materialni buzish va antigenni ajratayotganda qo’shimcha ishlov berishga to’g’ri keladi. ikkinchidan, bakteriyalarga nisbatan virus antigenlarining katta termolabilligi hisoblanadi. ko’pchilik viruslarda komplementni fiksatsiyalovchi antigen yuqumli bo’lakchalar bilan bog’langan bo’lib, ularning buzilishi yuqumlilikni yo’qolishi bilan parallel kechadi. shuningdek antigen olish uchun materialni hayvon o’lgach bir-ikki soat ichida, iloji bo’lsa tirik paytida olish kerak. virus saqlovchi materialni har xil dezinfeksiyalovchi moddalar bilan konservatsiyalash ko’pchilik …
3
mentning optimal bog’lanishi uchun antigen va antiteloni oldindan titrlash kerak bo’ladi. to’rtinchidan, kam hajmdagi antigen+antitelo kompleksiga kiradigan virus bo’lakchasi juda kichkina kattalikka ega shuning uchun komplementni fiksatsiyalash maydoni kam. komplementni fiksatsiyalash davrini uzaytirish yo’li bilan antigen+antitelo kompleksining hajmini ko’paytirish natijasida (4ocda 18 soat) reaksiyaning sezgirligi oshadi ammo uning spetsifekligi kamayadi; shuningdek uzoq vaqt fiksatsiyalash tufayli spetsifik bo’lmagan antigenlarni fiksatsiyalashi ko’payadi. beshinchidan, virus antigenining yuqori prokomplementar aktivligi. spetsifik bo’lmagan komplementni fiksatsiyalashni oldini olish uchun virus antigenini to’qima fermentlaridan to’lasincha tozalash zarur. odamlar va hayvonlarning virus kasalliklariga kbr dan foydalanib diagnoz qo’yishda katta to’siq bo’lib kasallikning har xil davrida virus antigeninig notekis to’planishidir. 2. kbr ning komponentlari: a) kasallangan hayvondan olingan, sinalayotgan virus antigenining epizootik shtammi; b) oqsil virusining variantga va turga oid shtammdagi virusi bilan giperimmunlangan dengiz cho’chqachasining zardobi (biofabrikada ishlab chiqariladi); c) nazoratdagi antigenlar oqsil virusining turga va variantga xos shtammi (biofabrikada ishlab chiqariladi); d) komplement - dengiz cho’chqachasining quritilgan …
4
vchi suyuqlikdan ph 7,4-7,6 bo’lgan fiziologik eritma yordamida tozalanadi, filtr qog’ozi bilan quritiladi, tarozida o’lchanadi, maydalangach mayda steril shisha qo’shilgan chinni havonchada bir xildagi massa hosil bo’lguncha yaxshilab aralashtiriladi. aftaning massasiga nisbatan ikki barobar 1 g aftaga ph 7,4-7,6 2 ml’ fiziologik eritma qo’shiladi. hosil bo’lgan 33% suspenziya xona haroratida 2 soat davomida qoldiriladi (ekstraksiyalanadi), -10,-200c da 5-18 soat davomida muzlatiladi. eritilgach 3-5 ming ail/daq. 30-15 daqiqa sentrifugalanadi. cho’kma ustidagi suyuqlik 580c da 40 daqiqa davomida aktivligi yo’qotiladi, agarda suyuqlik pag’a-pag’a holda bo’lsa uni qaytadan 10-15 daq. 3 ming ail/daqiqa sentrifugalanadi, so’ngra kbr uchun antigen sifatida ishlatiladi. gemolizinni tayyorlash. gemolizinni yangi seriyasi olinganda titrlanadi. titrlash umum qo’llaniladigan usul bo’yicha o’tkaziladi. biofabrikalar tomonidan ishlab chiqarilgan gemolizin ayrim hollarda glitserin bilan 1:1 konservatsiyalangan bo’ladi, shuning uchun gemolizinning asosiy (1:1000) suyultirilganini tayyorlashda 0,2 ml gemolizin va 9,8 ml fiziologik eritma (1:100), so’ngra shu suyultirilgandan 1:1000 suyultirib tayyorlanadi: 1 ml (1:10) gemolizinga 9 ml …
5
l 1:20 suyultirilgan komplement+0,5ml 2%-ertrotsitlar suspenziyasi+1,5ml fiziologik eritma); 4)gemolitik sistemani nazorat qilish (0,5 ml 1:1000 suyultirilgan gemolizin+0,5 ml 2% - eritrotsitlar suspenziyasi+0,5 ml 1:20 suyultirilgan komplement+ 1,0 ml fiziologik eritma) . titrlash natijasida gemolizinning eng so’nggi titri aniqlanadi. demak komplement ishtirokida, eritrotsitlarda minimal gemoliz chaqirish qobiliyati. keltirilgan sxemada gemolizinning suyultirish soni 1:3000 olingan. 1-iadval. suyultirilgan gemolizin tayyorlash sxemasi komponent-lar, ml gemolizinni suyultirish 1:1500 1:2000 1:3000 1:4000 1:5000 1:6000 1:7000 1:8000 gemolizin 1:1000 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 fiziologik eritma 0,5 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 2-jadvai. gemolizinni titrlash sxemasi. komponentlar, ml gemolizinni suyultirish 1:1000 1:1500 1:2000 1:3000 1:4000 1:5000 1:6000 1:7000 gemolizin 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 fiziologik eritma (antigen o’rniga zardobolar) 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1:20 suyultirilgan komplement 0.5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 2% eritrotsitlar suspenziyasi 0.5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 …

Ko'proq o'qimoqchimisiz?

Faylni Telegram orqali bepul yuklab oling.

To'liq faylni yuklab olish

"komplementni bog’lash reaksiyasi" haqida

1734505535.docx komplementni bog’lash reaksiyasi reja: 1. komplementni bog’lash reaksiyasining mohiyati. 2. komplementni bog’lash reaksiyasining komponentlarini tayyorlash. komplementni bog’lash reaksiyasi (kbr) ko’plab yequmli kasalliklarga diagnoz qo’yishda qo’llaniladigan an’anaviy serologik reaksiyalardan biri hisoblanadi. reaksiyaning nomi alohida ikki bosqichdan iborat bo’lib bajariladigan ishning mohiyatini malum darajada ko’rsatadi. birinchi bosqichda antigen va antitelo qatnashadi (oldindan shulardan biri malum bo’ladi), hamda oldindan titrlangan malum miqdorda komplement kerak bo’ladi. antigen va antitelo kompleksining mos kelishi tufayli komplementni biriktirib oladi, buni esa, ikkinchi bosqichda indikator vazifasini o’tovchi (qo’chqor eritrotsitlarining aralashmasi va ularga an...

DOCX format, 76,9 KB. "komplementni bog’lash reaksiyasi"ni yuklab olish uchun chap tomondagi Telegram tugmasini bosing.

Teglar: komplementni bog’lash reaksiyasi DOCX Bepul yuklash Telegram