immunoferment analiz

DOCX 20,2 КБ Бесплатная загрузка

Предварительный просмотр (5 стр.)

Прокрутите вниз 👇
1
1734505474.docx immunoferment analiz (elisa test) ifa (immmunoferment tahlil) reja: 1. ifa ning qo’llanilish sohalari. 2. ifa ning mohiyati. 3. ifa reaksiyasini qo’yish texnikasi 1. immunoferment analiz – antigen-antitelo o’rtasidagi reaksiyalarning maxsusligi va yuqori tanlanishiga asoslangan laboratoriya tekshirishlaridir. ifa ning bir necha o’nlab modifikatsiyalari farqlanadi. eng keng tarqalgani qattiq fazali geterogen immuno tahlil usuli – elisa (ensime linked immunosorbent assia) hisoblanadi. ifa ikkita maqsadda qo’llaniladi: turli xil yuqumli kasalliklar qo’zg’atuvchilarining antigenlarini aniqlash; ko’pincha turli kasalliklar qo’zg’atuvchilarini antigenlariga antitelolar (ig a, ig m, ig g) ni birikishini aniqlash uchun. shu sababli ifa bugungi kunda sog’liqni saqlash, qishloq xo’jaligi, sanoat biotexnologiyasi, tabiatni asrash va ilmiy tadqiqot ishlarida keng qo’llanilmoqda. odam va hayvonlarning har qanday kasalliklari qo’zg’atuvchilarini, ularning alohida antigen komponentlarini shu komponentlarga antitelolarini identifikatsiyalash yo’li bilan yoki sog’lom organizm uchun xos bo’lmagan va uning patologik jarayonlarida sintezlanadigan (o’sma, yurak qon tomir, endokrin kasalliklarida) moddalarni aniqlab diagnoz qo’yish shular jumlasidandir. aholini dispanserlash, epidemiologik tekshirish, …
2
larni ifasiz tasavvur qilib bo’lmaydi. ifa yordamida barcha jinsiy organlarnng yuqumli kasalliklariga qarshi antitelolar (agar organizm ularni ishlab chiqargan bo’lsa)ni aniqlash mumkin. 2. ifa asosida antigen va antitelolarning immun reaksiyasi yotadi. antiteloga belgilangan fermentning birikishi esa fermentativ faolligi yoki reaksiya borishini darajasini oshishining ko’rinishiga qarab antigen – antitelo reaksiyasi natijasini hisobga olish (aniqlash) imkonini beradi. soddalashtirilgan ko’rinishda reaksiyasini mexanizmini quyidagicha tasavvur qilish mumkin. birinchi reaksiya aniqlanadigan ig (av) va qo’zg’atuvchining tozalangan hamda immunologik planshet yuzasida qotirilgan antigeni o’rtasida amalga oshadi. hosil bo’lgan immunkompleksni aniqlash uchun ikkinchi immunologik reaksiya o’tkaziladi. bunda antigen sifatida bog’langan spesifik iimunoglobulinlar qatnashsa, unga qarshi antitelo sifatida peroksidaza fermenti bilan belgilangan ig (av) dan iborat konyugat xizmat qiladi. keyinchalik molekulaning ferment qismi katalizlanishi natijasida fermentativ reaksiya yuz beradi. substrat sifatida xromogen qo’shilib, reaksiya davomida rangning o’zgarishi yuzaga keladi. rangning intensivligi namunada immunoglobulinlarning miqdoriga bog’liq bo’ladi. reaksiya yakunlangach maxsus asboblar yordamida fotometrik o’lchashlar o’tkaziladi. nazoratdagi namunalar bilan optik …
3
da antitelolar mavjud bo’lsa u holda ular bu bosqichda antigen sifatida qatnashadi. ular “belgilangan” antitelo bilan ta’sirlashadi. yana yuvilib tashlanadi. so’ngra xromogen modda qo’yilishi katakchalardagi bo’yalishning rivojlanishiga qarab reaksiya natijasini hisoblash imkonini beradi. uning intensivligi fermentning (demak-ki antitelalarning) miqdoriga bog’liq bo’ladi. katakchadagi suyuqlikning optik zichligini o’lchash va uni nazorat namunalari bilan taqqoslashda hajm birligidagi antitelolar konsentratsiyasi hisoblab chiqiladi. ko’pincha optik zichlik birligidagi natijalar hisoblash usuli qo’llaniladi. shuni hisobga olish kerakki, har bir test tizimi uchun norma va patologiyasining natijalarini hisobga olishning o’z ko’rsatkichlari mavjud, natijalar interpretatsiyasida shunga mo’ljal olish lozim. antigen yoki antiteloni ferment bilan “belgilash”ning bioximik, immunobiologik va gen injeneriyasi yordamida amalga oshirish usullari mavjud. elisa (ensime linked immunosorbent assia) immunosorbent bilan bog’langan fermentni aniqlash. polistirol planshetlarda maxsus spektral asboblar yordamida 1 daqiqa davomida 96 ta katakchada 96 ta namunada aniqlash mumkin. umuman getorogen ifa ni qo’yish uchun 3-4 soat vaqt ketadi. ifa ning sezgirligi 1 ml moddalarni konsentratsiyalaridagi …
4
ilgan tizimlarda (tozalangan antigen va yuqori spesifik antitelolar bilan)gina qo’llanilishi ham uning cheklanganligidir. yuqori sezgirligi va tekshirishning tezkorligi (bir necha daqiqadan bir necha soatgacha), bir vaqtning o’zida ko’plab namunalarni tekshirish mumkinligi va buning uchun namunalarni oldindan tozalash va konsentratsiyalashning zarurati yo’qligi ifa ga boshqa tekshirish usullariga nisbatan ustunlik beradi. immunoferment usul mikroorganizmlar va antitelolarni aniqlash hamda qiyoslash uchun qo’llanadi. immunoferment usulining ikki turi farqlanadi: gomogen va geterogen. geterogen usul (immunosorbentli elisa test) va suvda erimaydigan polimerazali materiallar yuzasida adsorbirlangan enzimi nishonlangan antitelolar (yoki antigenlar) reaksiyasi (enar). gomogen immunoferment usulida qattiq (zich) faza ishlatilmaydi; asosan past molekulali antigenlarni (gormonlar, dorivor preparatlarni) aniqlash uchun ishlatiladi. zich fazali immunofermentli usul komponentlari: l. maxsus immunoglobulinlar (immun zardobdan ammoniy sulfat bilan cho’ktirib, keyin tozalab olinadi). 2. turga qarshi globulinlar (giperimmun zardobdan ammoniy sulfat bilan cho’ktirib, keyin tozalab olinadi). 3. oqsil a (tilla rang stafilokokkdan olinadi) yoki ho’kiz zardobi albumini. 4. antigen (zararlangan hayvonlar organlaridan tayyorlanadi). …
5
sh. reaksiyani qo’yishdan avval, liofillangan komponentlar yorlig’ida ko’rsatilgan hajmda 0,01 m fosfatli bufer eritma yoki distillangan suv bilan eritiladi va ishchi eritma hajmiga yetkaziladi. planshet o’yiqchalariga bosqichma bosqich solinadigan komponentlar o’zaro teng hajmda bo’lib, 0,1 ml ni tashkil etadi. reaksiya bosqichlari: l.planshetni sensibillash. planshet o’yiqchalariga maxsus antitelalar (immunoglobulinlar) yorlig’ida ko’rsatilgan ishchi eritmasi quyiladi. planshet antitelalar bilan uch soat termostatda 37°c da yoki 18 soat 4°c daqo’yiladi. keyin planshetlartvinli fosfat buferi eritmasi bilan 3-4 marta yuviladi. eritmaning qoldiqlari filtr qog’ozga planshetni bir necha bor qoqib olinadi. 2.antigen qo’yish. maxsus antitelalar bilan sensibillangan planshet o’yiqchalariga nazoratli musbat va manfiy antigenlar hamda 1:10 dan 1:1280 nisbatgacha suyultirilgan sinovli namunani quyib, termostatda 37°c da 1 soat undiriladi. inkubasiya muddati o’tishi bilan planshet o’yiqchalaridagi antitela bilan bog’lanmay qolgan antigenlarni uch marta yuvib, filtr qog’ozda quritiladi. 3.antigen + antitelo kompleksini aniolash uchun suyultirmalarga turga qarshi perosidazali kon’yugatni quyish. kon’yugat quyib chiqilgach planshetalar termostatga 37°c da 1 …

Хотите читать дальше?

Скачайте полный файл бесплатно через Telegram.

Скачать полный файл

О "immunoferment analiz"

1734505474.docx immunoferment analiz (elisa test) ifa (immmunoferment tahlil) reja: 1. ifa ning qo’llanilish sohalari. 2. ifa ning mohiyati. 3. ifa reaksiyasini qo’yish texnikasi 1. immunoferment analiz – antigen-antitelo o’rtasidagi reaksiyalarning maxsusligi va yuqori tanlanishiga asoslangan laboratoriya tekshirishlaridir. ifa ning bir necha o’nlab modifikatsiyalari farqlanadi. eng keng tarqalgani qattiq fazali geterogen immuno tahlil usuli – elisa (ensime linked immunosorbent assia) hisoblanadi. ifa ikkita maqsadda qo’llaniladi: turli xil yuqumli kasalliklar qo’zg’atuvchilarining antigenlarini aniqlash; ko’pincha turli kasalliklar qo’zg’atuvchilarini antigenlariga antitelolar (ig a, ig m, ig g) ni birikishini aniqlash uchun. shu sababli ifa bugungi kunda sog’liqni saqlash, qishloq xo’ja...

Формат DOCX, 20,2 КБ. Чтобы скачать "immunoferment analiz", нажмите кнопку Telegram слева.

Теги: immunoferment analiz DOCX Бесплатная загрузка Telegram