vektorlar va ularning qoʻllanilishi

PPTX 41 pages 959.2 KB Free download

41 pages

FaylHub.uz

Download via Telegram

Size 959.2 KB

File type PPTX

Pages 41

Updated Dec 2025

Page preview (5 pages)

Scroll down 👇

1 / 41

slayd 1 biotexnologiya talabalar uchun ma'ruza kursiivfakultet kursi gertsen nomidagi rossiya davlat pedagogika universitetining biologiyasi yo'nalish020400 biologiya profilumumiy biologiya zoologiya kafedrasi professori biologiya fanlari doktori, professor nadejda vasilevna tsymbalenko translated from russian to uzbek - www.onlinedoctranslator.com uchun genetik vektorlar dnk klonlash hozirgi vaqtda o'rganilayotgan dnkning ma'lum bir hududining kerakli miqdorini olishning ikkita usuli mavjud.: 1dnk klonlashin vivoprokaryotik yoki eukaryotik hujayralarda (klonlash - klonni olish, ya'ni ajdodlar hujayralari to'plami). 2. dnk amplifikatsiyasiin vitropolimeraza zanjiri reaktsiyasi (pcr) usuli bilan. dnk klonlash uchun in vivo kerak: dnk qo'shimchasi (maqsadli dnk, qiziqtirgan dnk); dnk vektori (genetik klonlash vektori); xost hujayra; ferment asboblar to'plami va yordamchi oligonukleotidlar molekulyar klonlash kerakli dnk fragmentini kiritishga asoslanadi (qo'shimchalar) boshqa dnk molekulasiga (vektor), qaysi kiritishga qodiryangi dnk ketma-ketligini o'z ichiga oladi,ularning o'tkazilishini ta'minlashyaratilgan tizimlarga kiradi in vitro dnk replikatsiya qiladiin vivo,keltirib chiqaradiyangiklonlashhujayralar,ajoyib fenotipik tarzda asl xost hujayralaridan (oluvchi). genetik ma'lumotni uzatish vektori bir qator asosiy talablarga javob berishi kerak: …

2 / 41

a yaratilgan (f- plazmidlar,r-plazmidlar, degradatsiya plazmidlari, sirli plazmidlar) ferment vositalaridan foydalangan holda genetik muhandislik usullari bilan. yuqori nusxali plazmidlar har bir hujayrada 10-1000 dnk nusxasida mavjud. kam nusxali plazmidlar hujayrada 1-4 nusxada mavjud. klonlash vektoripbr322 u 1980-yillarda bolivar va rodriges tomonidan yaratilgan va dnkni klonlash uchun eng mashhur universal vektorlardan biri hisoblanadi. qarshilik genlari tetratsiklin uchun( ) va ampitsillin( ) noyob saytlarni o'z ichiga oladi uchun tan olish hindiii,sali,bamhivapsti. bilanaity ekorivapvuiijoylashgan bu genlardan tashqarida. vektor uzunligi 4361 bp. plazmidni o'z ichiga olgan hujayralarning fenotipik xususiyatlaripbr322 qo'shimchali va qo'shimchasiz transformatsiya- bakterial hujayraga rekombinant dnkni kiritish jarayoni. xost hujayra ma'lum bir fenotipga ega bo'lishi kerak: r, ya'ni unda cheklovchi fermentlar bo'lmasligi kerak; u umumiy rekombinatsiyaga qodir bo'lmasligi kerak (reca)shuning uchun ekzogen dnk gomologik rekombinatsiya bilan o'zgartirilmaydi. transformatsiya chastotasi- hujayra populyatsiyasida begona dnkni olgan hujayralar nisbati; hujayralarning umumiy soniga transformatorlar soni sifatida ifodalanadi. transformatsiya samaradorligi- transformatsiya uchun olingan 1 mkg dnkga transformantlar soni. …

3 / 41

r. bundan tashqari,tanlashunga asoslangan rekombinant dnk bilan tajribalarda transformatsiyalangan hujayralar ko'p vaqt talab etadi. oila vektorlari guruhipuc "unicom klonlash” – ma’lum vektorga xos bo‘lgan bir qator cheklovchi endonukleazalarni tanib olish joylaridan tashkil topgan nukleotidlar ketma-ketligi bo‘lgan polilinkerning dnk strukturasida mavjudligini ko‘rsatadi. oiladan individual vektorlarning nomlaripucikki xonali son bilan farqlanadi va turli vektorlarning birlamchi tuzilishi saytlar tarkibida farqlanadimcs -ko'p klonlash saytlaripolilinkerda. plazmid vektoripuc19 puc19 o'z ichiga oladi: -ampitsillinga qarshilik geni (amp); -b-galaktosidaza genining tartibga solinadigan segmenti (lacz)laktoza operone.coli; -genlaci,gen ifodasini nazorat qiluvchi repressorni kodlashlacz; -polylinker - re uchun bir nechta noyob saytlar bilan qisqa ketma-ketlik; -replikatsiyaning kelib chiqishi plazmidlar pbr322. iptg (izopropil-b-d-tiogalaktopiranozid) - induktorlak-operon. uning mavjudligida gen mahsulotilacigenning promotor-operator mintaqasi bilan bog'lana olmaydilacz, va natijada genning plazmid qismining transkripsiyasi va tarjimasi sodir bo'ladilacz. ushbu fragmentning mahsuloti xromosoma dnk tomonidan kodlangan oqsil bilan bog'lanadi (a-to‘ldiruvchi) , va natijada faol b-galaktosidaza hosil bo'ladi. ikkinchisining substrati 5-bromo-4-xloro-3-indolil-b-d-galaktopiranosil (x-gal) gidrolizlanadi va o'zgartirilmagan plazmidni o'z ichiga …

4 / 41

erak bo'ladi. buning uchun quyidagi vektorlar ishlab chiqilgan: 1. fag dnksi asosida, xususan, bakteriofag l dnksi asosida.e.coli. 2. kosmidlar. 3. sun’iy bakterial xromosomalar (bac). bakteriofagga asoslangan vektorlarl. fag l ning hujayralarga kirishining ikkita muqobil yo'lie.coli.: 1.litik sikl- fag faol ko'paya boshlaydi va taxminan 20 daqiqadan so'ng hujayra 100 tagacha yangi fag zarralari chiqishi bilan yo'q qilinadi. 2.lizogenez holati- fag dnksi xromosomaga kiritilgane.coliprofag sifatida va oddiy bakteriya hujayralari bilan birga hujayra ichida ko'payadi. biroq, noqulay sharoitlarda (oziqlanishning etishmasligi) litik tsikl ishga tushiriladi. fag l rivojlanishining litik yo'li 1. bakteriofag l ning dumaloq dnksi replikatsiya qilinganda uzunligi taxminan 50 kb bo'lgan takrorlanuvchi segmentlardan iborat chiziqli molekula hosil bo'ladi. ushbu segmentlarning har biri yopishqoq bilan qoplangan to'liq uzunlikdagi fag dnksidirchunki-veb-saytlar. 2. fag boshi shunday segmentni o'z ichiga oladi, keyin allaqachon yig'ilgan jarayon boshga biriktiriladi. aralashin vitroprobirkada bo'sh boshlar, fag dnksi va to'plangan jarayonlar yuqumli fag zarralarini olish uchun ishlatilishi mumkin. rivojlanishning litik yo'li …

5 / 41

iluvchi hujayralarga begona genetik ma'lumotlarning o'rnatilgan fragmenti bilan rekombinant fag dnkni kiritish jarayoni tabiiy hodisaga asoslanadi -transduktsiyafag dnk. transduktsiya(lat.transduktsiya(translokatsiya) - bakteriofag tomonidan bakteriya dnksini bir hujayradan ikkinchisiga o'tkazish jarayoni. shunday qilib, fag dnkga asoslangan rekombinant dnk yordamida bakterial hujayralarning transformatsiyasi qabul qiluvchi hujayralarni yoki biron bir maxsus asbob-uskunalarni maxsus tayyorlashni talab qilmaydi. kosmidlar-replikatsiyaning plazmid turi yordamida takrorlanadigan va qadoqlash qobiliyatiga ega bo'lgan gibrid vektor turlaridan biriin vitrol fag zarralarining qobiqlariga kiradi. bunday vektorlar 40 kb gacha bo'lgan xorijiy dnkni o'z ichiga olishi mumkin. juda katta dnk fragmentlarini klonlash uchun vektor tizimlari(qo'shimchalar >100 kb) murakkab eukaryotik genomlarni tahlil qilishda katta ahamiyatga ega. 100 dan 300 kb gacha bo'lgan o'lchamdagi dnk fragmentlarini klonlash uchun p1 bakteriofagiga asoslangan past nusxali plazmid vektori - p1 fagiga asoslangan sun'iy xromosoma qurilgan. asosf-plazmidlare. coliyaratilganbac (bakterial sun'iy xromosomalar). parchalarni klonlash katta dnk bilan sizning yordamingiz bilan bac uzunligi 150 dan 350 kbit / s gacha bo'lgan qo'shimchalarni …

Want to read more?

Download all 41 pages for free via Telegram.

Download full file

About "vektorlar va ularning qoʻllanilishi"

slayd 1 biotexnologiya talabalar uchun ma'ruza kursiivfakultet kursi gertsen nomidagi rossiya davlat pedagogika universitetining biologiyasi yo'nalish020400 biologiya profilumumiy biologiya zoologiya kafedrasi professori biologiya fanlari doktori, professor nadejda vasilevna tsymbalenko translated from russian to uzbek - www.onlinedoctranslator.com uchun genetik vektorlar dnk klonlash hozirgi vaqtda o'rganilayotgan dnkning ma'lum bir hududining kerakli miqdorini olishning ikkita usuli mavjud.: 1dnk klonlashin vivoprokaryotik yoki eukaryotik hujayralarda (klonlash - klonni olish, ya'ni ajdodlar hujayralari to'plami). 2. dnk amplifikatsiyasiin vitropolimeraza zanjiri reaktsiyasi (pcr) usuli bilan. dnk klonlash uchun in vivo kerak: dnk qo'shimchasi (maqsadli dnk, qiziqtirgan dnk); dnk vektori...

This file contains 41 pages in PPTX format (959.2 KB). To download "vektorlar va ularning qoʻllanilishi", click the Telegram button on the left.

Tags: vektorlar va ularning qoʻllanil… PPTX 41 pages Free download Telegram