molekulyarno-geneticheskie metodi v issledovanii rasteniy

PPTX 38 sahifa 13,5 MB Bepul yuklash

Sahifa ko'rinishi (5 sahifa)

Pastga aylantiring 👇
1 / 38
videlenie dnk videlenie dnk literatura kutlunina n.a., ermoshin a.a. molekulyarno-geneticheskie metodi v issledovanii rasteniy : ucheb.-metod. posobie. m-vo obrazovaniya i nauki ros. federatsii, ural. feder. un-t. – ekaterinburg : izd-vo ural. un-ta, 2017. – 142 s. metodi videleniya dnk iz biologicheskogo materiala https://vmtbio.ru/isolation-dna/ rabota s reaktivami belgilashga e'tibor bering. faqat imzolangan reagentlardan foydalaning. zarur bo'lganda, saqlash muddatini hisobga olish uchun konteynerni reagent bilan ochish sanasini belgilang. reaktiv bilan idishda quyidagilar ko'rsatilgan: nomi va molekulyar formulasi; katalog raqami va firma nomi; partiya raqami; mahsulot iste'mol qilish uchun yaroqli bo'lgan sana; saqlash shartlari. 3 vzveshivanie esli pri vzveshivanii reaktiv (ob'ekt) popal na vesi: ne nado ego sduvat! sleduet akkuratno snyat chashku (i, esli nado, verxniy kojux vesov); vimit kojux i nasuxo ego proteret; vesi proteret vlajnoy tryapkoy/salfetkoy, nasuxo viteret; vsyo sobrat. avtomaticheskaya pipetka issiq, sovuq, yopishqoq eritmalar va past sirt tarangligi bilan echimlar bilan ehtiyotkorlik bilan ishlang. suyuqlikning noto'g'ri miqdorini tanlash (past …
2 / 38
ulyar-biologik ishlarda, hujayralar, to'qimalar va organlarning madaniyati bilan ishlaydi. steril havo qutiga laminar oqim (aylanmasiz yagona havo harakati) bilan ta'minlanadi. nima uchun nc ni ajratish kerak? dnk va rnkning izolyatsiyasi biokimyoviy va diagnostika jarayonlaridan oldin namunalarni tayyorlashda muhim qadamdir. oldindan ajratilgan va tozalangan nuklein kislotalar (nk) bilan biologik namunalarda real vaqt rejimida pcr, klonlash, dnk sintezi va boshqa protseduralar yordamida amplifikatsiya mahsulotlarini amplifikatsiyalash, teskari transkripsiya, aniqlash amalga oshiriladi. 11 ptsr pcr (polimeraza zanjir reaktsiyasi) dnkga bog'liq dnk polimeraza fermenti bilan katalizlangan dnk shablonidagi qo'shimcha dnk ipining sintez reaktsiyasi. ferment termostabil bo'ladi – bu denatürasyon bosqichida zarur yuqori harorat chiday mumkin. polimeraza ishlashining tegmaslik darajasi taxminan 72 ° c ni tashkil etadi. optimal sintez sharoitlarini yaratish uchun dnk namunasi reaktsiya aralashmasiga joylashtiriladi. amerikalik biokimyogar carrie mullis 1993-yil kimyo bo'yicha nobel mukofoti laureati (bilan birgalikda maykl smit) pcr ixtirosi uchun reaktsionnaya smes sostoit: - bufer dlya ptsr. eto buferniy rastvor s opredelennim …
3 / 38
lyarno-geneticheskix issledovaniy. ispolzuetsya dlya dovedeniya reaktsionnoy smesi do rabochey kontsentratsii. - dnk. sobstvenno, sam obrazets dnk, kotoriy neobxodimo issledovat. 12 ingibitori ptsr izmenyayut konformatsiyu fermenta, umenshayut ego aktivnost. ingibitor kontsentratsiya ingibitora sds > 0.005% fenol > 0.2% etanol > 1% izopropanol > 1% atsetat natriya > 5 mm xloristiy natriy > 25 mm edta > 0.5 mm gemoglobin > 1 mg/ml mochevina > 20 mm agaroza (videlenii dnk iz gelya) > 1% rnk > 0,5 mkg/20mkl reaktsionnaya smes > 15% pri doljnom kachestve vsex komponentov reaktsionnoy smesi reaktsiya mojet ingibirovatsya tolko iz-za ploxoy ochistki dnk. ingibitori ptsr predstavlyayut soboy veshestva, sposobnie povliyat na konformatsiyu fermenta i umenshit ego aktivnost, vplot do polnoy deaktivatsii. eti primesi mogut okazatsya v rastvore dnk po dvum prichinam: 1) ploxaya ochistka obraztsa ot ostatkov veshestv, kotorie soderjalis v materiale, iz kotorogo proizvodilos videlenie. ingibirovat ptsr mogut ostatki jirov, belkov, uglevodov, pigmentov (dlya rastitelnix kletok – …
4 / 38
i va vaqt sinovidan o'tdi, ammo hozirda bozorda nuklein kislotalarni izolyatsiya qilish uchun zarur bo'lgan reagentlarning ko'pchiligini o'z ichiga olgan to'liq to'plamlarni o'z ichiga olgan mahsulotlarning keng assortimenti mavjud. ularning ko'pchiligi süpernatant olib tashlash bilan ta'qib bir necha santrifüj qadamlar, talab qiladi. so'nggi yillarda avtomat tizimlarga talab oshdi (ndt rentabelligi va materialning tozaligi, tajribaning takrorlanishi va bashorat qilinishi maksimal bo'lib, ifloslanish (ifloslanish) xavfi kamayadi. supernatant - faza dispersionnoy sistemi, kotoraya raspolagaetsya sverxu ot granitsi razdela faz. videlenie nukleinovix kislot –bazoviy metod molekulyarnoy biologii. v proshlom protsess videleniya i ochistki nk bil slojnim i dostatochno zatratnim. na segodnyashniy den imeetsya mnojestvo spetsializirovannix metodik, kotorie mogut ispolzovatsya dlya videleniya nukleinovix kislot s visokoy stepenyu ochistki. 14 nk izolyatsiya usullari https://vmtbio.ru/isolation-dna/ fenol-xloroform ekstrakti (guanidinium thiocyanate-fenol-xloroform ekstraktsiyasi). fta kartalari. tijorat to'plamlaridan (kit) foydalanish silikat tashuvchilar (silika, silica matrisler). shisha zarrachasi. diatomit. magnit boncuk asosidagi nuklein kislotasini tozalash yordamida nuklein kislotasini tozalash. anion almashinuvi qatronlar. …
5 / 38
liza. pri etom neobxodimo uchitivat variatsii soderjaniya nk v razlichnix organax i tkanyax, a takje umenshenie soderjaniya nk iz-za degradatsii, esli obrazets bil vzyat cherez bolshoy promejutok vremeni posle smerti jivotnogo. ekstraktsiyu nukleinovix kislot sleduet nachinat kak mojno skoree posle otbora svejix tkaney. tkan mojet xranitsya v usloviyax nizkoy temperaturi v xolodilnike v techenie neskolkix dney bez riska degradatsii nk. odnako, esli videlenie nevozmojno v blijayshee vremya, obrazets doljen bit zamorojen do temperaturi ot -20°c do -80°c. pri etom tselesoobrazno ispolzovat dlya xraneniya i perevozki obraztsov odnorazovuyu plastikovuyu probirku ili drugie plotno zakrivayushiesya emkosti. 16 dnk izolyatsiyasining xususiyatlari o'simlik ob'ektlaridan o'simlik obyektlaridan dnkni ajratishda hujayrali fermentlarni faolsizlantirish, saqlash moddalarini (polisakkaridlarni), ikkilamchi metabolitlarni "olib tashlash" kerak: alkaloidlar, fenolik birikmalar, terpenlar, dnkni ajratishga to'sqinlik qiladi va uning sifatiga salbiy ta'sir ko'rsatadi turli taksonlar vakillarida metabolitlarning xilma-xilligi va ba'zan o'simliklarning bir xil turlari vakillari tufayli, dnk izolatsiyasi uchun yagona optimal protokol mavjud emas. …

Ko'proq o'qimoqchimisiz?

Barcha 38 sahifani Telegram orqali bepul yuklab oling.

To'liq faylni yuklab olish

"molekulyarno-geneticheskie metodi v issledovanii rasteniy" haqida

videlenie dnk videlenie dnk literatura kutlunina n.a., ermoshin a.a. molekulyarno-geneticheskie metodi v issledovanii rasteniy : ucheb.-metod. posobie. m-vo obrazovaniya i nauki ros. federatsii, ural. feder. un-t. – ekaterinburg : izd-vo ural. un-ta, 2017. – 142 s. metodi videleniya dnk iz biologicheskogo materiala https://vmtbio.ru/isolation-dna/ rabota s reaktivami belgilashga e'tibor bering. faqat imzolangan reagentlardan foydalaning. zarur bo'lganda, saqlash muddatini hisobga olish uchun konteynerni reagent bilan ochish sanasini belgilang. reaktiv bilan idishda quyidagilar ko'rsatilgan: nomi va molekulyar formulasi; katalog raqami va firma nomi; partiya raqami; mahsulot iste'mol qilish uchun yaroqli bo'lgan sana; saqlash shartlari. 3 vzveshivanie esli pri vzveshivanii reaktiv (ob'ekt) ...

Bu fayl PPTX formatida 38 sahifadan iborat (13,5 MB). "molekulyarno-geneticheskie metodi v issledovanii rasteniy"ni yuklab olish uchun chap tomondagi Telegram tugmasini bosing.

Teglar: molekulyarno-geneticheskie meto… PPTX 38 sahifa Bepul yuklash Telegram