pzr amplifikator uchun ishchi aralashma tayyorlash va termotsikler bilan ishlash

DOCX 7 sahifa 537,1 KB Bepul yuklash

7 sahifa

FaylHub.uz

Telegram orqali yuklab olish

Hajm 537,1 KB

Fayl turi DOCX

Sahifalar 7

Yangilangan Dek 2025

Sahifa ko'rinishi (5 sahifa)

Pastga aylantiring 👇

1 / 7

5-amaliy mashg’ulot. termotsikler (pzr) bilan ishlashni o’rganish. dnk markerlari hamda restriktaza fermentlari bilan ishlashni o’rganish 1-qism 5.1-ish. ishdan maqsad: pzr-amplifikator uchun ishchi aralashma tayyorlash va termotsikler bilan ishlashni o’rganish. kerakli asbob va jihozlar: retsept, kichik og’zi yopiladigan probirkalar (200 mkl), dozator, kerakli reaktivlar, pzr apparati. ishning mazmuni: polimer zanjir reaktsiyasi biologik material yoki namunadagi kam kontsentratsiyali ma’lum bir dnk fragmentlarining ortishiga imkon beruvchi molekulyar biologiyadagi ekspremental usuldir. dnk polimeraza va teskari transkriptsiya fermentlari ishtirokida dnk bo’laklarining sezilarli darajada ortishiga imkon yaratadi. genomika va biologik tibbiyotda keng qo’llaniladi. 1983 yilda amerikalik bioximik keri myullis tomonidan kashf qilingan. pzr amplifikator asbobi yordamida amalga oshiriladi. psr texnologiyasi bu - qisqa vaqt ichida ma’lum dnk fragmentidan sun’iy ravishda minglab nusxalarini olish imkonini beradi. bunda dastlab olingan dnk molekulasi isitiladi, spirali to’g’irlanadi va ikki komplementar zanjiri bir-biridan ajratiladi. so’ngra praymerlar yordamida matritsa dnk zanjiridan komplementarlik asosida sun’iy dnk ning ikkinchi zanjiri sintezlanadi. pzr 3 bosqichdan …

2 / 7

a navbat bilan solinadi. praymer oxirida qo’shiladi. masalan, quyidagi retsept bo’yicha master mix tayyorlash (32 ta namunaga 4 xil praymer) -sterillangan distillangan suv- 6.69 /214 mkl -10x lik pzr bufer- 1/32 mkl -bsa- 0.2/6.4 mkl -dntp- 0.08/2.56 mkl -pr- 0.2/6.4 mkl -tag polimeraza- 0.3-9.6 mkl har biri uchun alohida 10, 100, 1000 lik dozatorlar ishlatilib, mikrolitrlarda o’lchanadi (23-rasm). 22-rasm. master mix tayyorlash uchun jihozlar master mix tarkibidagi bu reaktivlar quyidagi vazifalarni bajaradi: -10x lik pzr bufer- jarayonda ishqoriy muhitni saqlab, buferlikni ta’minlab turadi. -bsa-buqa zardob albumini, katalizator vazifasini bajaradi. -dntp- nukleotidlar jamlanmasi -pr- praymer -tag polimeraza- tikuv mashinasiga o’xshab, chargaff qonuniga muvofiq nukleotidlarni bir-biriga tikib beradi. 5. hammasi solingach, cho’ktirish uchun short qilinadi. 6. 8 xil g’o’zaning dnk sining har biri 4 xil praymerli master mix bilan aralashtiriladi: 1.2 mkl dnk+8.5-9 mkl master mix 23-rasm. master mix tayyorlash jarayoni ii. termotsikler (pzr) bilan ishlashni o’rganish. reaktsiya qo’yish. 1. yuqorida tayyorlangan …

3 / 7

tushadi. 9. hosil bo’lgan pzr mahsulotini muzlatgichda 100 c da hohlagancha saqlash mumkin. 5.2- ish. ishdan maqsad: dnk markerlari hamda restriktaza fermentlari bilan ishlashni o’rganish. kerakli asbob va jihozlar: kichik hajmli probirkalar, dozator, tayyor markerlar, plazmidalar va restriktazalar, muz, pzr, short. genomika va bioinformatika markazida 5-6 ming praymerlar bor. ular genlarni kartalashtirish uchun kerak. ishning mazmuni: restriktsiyalash- restriktaza yoki endonukleaza deb ataluvchi fermentlar yordamida dnk molekulasini spetsifik bo’laklarga bo’lish. dnk molekulasining 51 uchida fosfat, 31 uchida gidroksil gruppa bo’ladi. har bir restriktaza o’zining aniq taniydigan restriktsiya saytiga ega. restriktazalar 2 xil kesadi. 1. yopishqoq uchlar hosil qilib (ecori, hind iii); 2. to’mtoqlar uchlar hosil qilib (hae iii). restriktsiya mexanizmlarini o’rganishning ahamiyati: · restriktsiya mexanizmlarini o’rganish genetik tadqiqotlarni ancha soddalashtirdi. · restriktsiyalash genetik materialni mayda bo’laklarga bo’lish imkonini berdi. · fizik usullar (agaroza gelidagi elektroforez) yordamida mazkur bo’laklarni o’lchamiga qarab ajratish, so’ngra har birini restriktsiya xaritalarini tuzish orqali alohida o’rganish mumkin …

4 / 7

er - 2 mkl - bam h1 restriktaza – 0.5 mkl - nrul restriktaza – 0.5 mkl (bu restriktaza dnk ni to’mtoq uch hosil qilib kesadi) -bizga kerakli gen saqlagan dnk molekulasi 11. 4 probirka uchun -10x lik bufer - 2 mkl - sak 1 restriktaza- 0.5 mkl (bu restriktaza dnk ni yopishqoq uch hosil qilib kesadi) - nrul restriktaza – 0.5 mkl -topo xl vektor plazmidi- 7 mkl bu yerda fosforli plazmid 2 xil 1 va 4 probirkadagi fermentlar yordamida kesilyapti. 11. ish tugagach, short qilinadi (27-rasm). 12. so’ng 370 c ga 3 soat termotsiklerga qo’yamiz. 13. pzr apparatida kesish boshlanadi. 14. vaqt tugagach, termotsiklerdan olib, 1% li agaroza gelida elektroforezga qo’yiladi. 15. gelda ko’rib, kerakli joy kesib olinadi. markerga qarab o’lchami orqali aniqlanadi. 16. kesib olingan dnk bo’lagi konbo kit yordamida geldan tozalanadi. 17. ligaza reaktsiyasi -ligaza- 1 mkl -10x lik bufer - 2 mkl -1 probirkadan- 2 …

5 / 7

pzr amplifikator uchun ishchi aralashma tayyorlash va termotsikler bilan ishlash - Page 5

Ko'proq o'qimoqchimisiz?

Barcha 7 sahifani Telegram orqali bepul yuklab oling.

To'liq faylni yuklab olish

"pzr amplifikator uchun ishchi aralashma tayyorlash va termotsikler bilan ishlash" haqida

5-amaliy mashg’ulot. termotsikler (pzr) bilan ishlashni o’rganish. dnk markerlari hamda restriktaza fermentlari bilan ishlashni o’rganish 1-qism 5.1-ish. ishdan maqsad: pzr-amplifikator uchun ishchi aralashma tayyorlash va termotsikler bilan ishlashni o’rganish. kerakli asbob va jihozlar: retsept, kichik og’zi yopiladigan probirkalar (200 mkl), dozator, kerakli reaktivlar, pzr apparati. ishning mazmuni: polimer zanjir reaktsiyasi biologik material yoki namunadagi kam kontsentratsiyali ma’lum bir dnk fragmentlarining ortishiga imkon beruvchi molekulyar biologiyadagi ekspremental usuldir. dnk polimeraza va teskari transkriptsiya fermentlari ishtirokida dnk bo’laklarining sezilarli darajada ortishiga imkon yaratadi. genomika va biologik tibbiyotda keng qo’llaniladi. 1983 yilda amerikalik biox...

Bu fayl DOCX formatida 7 sahifadan iborat (537,1 KB). "pzr amplifikator uchun ishchi aralashma tayyorlash va termotsikler bilan ishlash"ni yuklab olish uchun chap tomondagi Telegram tugmasini bosing.

Teglar: pzr amplifikator uchun ishchi a… DOCX 7 sahifa Bepul yuklash Telegram