пцр

PPTX 12 pages 717.9 KB Free download

12 pages

FaylHub.uz

Download via Telegram

Size 717.9 KB

File type PPTX

Pages 12

Updated Dec 2025

Page preview (5 pages)

Scroll down 👇

1 / 12

пцр пцр выполнил баев а.ю. история в начале 1970-х годов норвежскому ученому хьеллю клеппе из лаборатории нобелевского лауреата хара гобинды хораны пришла в голову мысль, что можно амплифицировать днк с помощью пары коротких одноцепочечных молекул днк — синтетических праймеров . однако в то время эта идея осталась невостребованной. полимеразная цепная реакция была вновь открыта в 1983 году кэри маллисом. его целью было создание метода, который бы позволил амплифицировать днк в ходе многократных последовательных удвоений исходной молекулы днк с помощью фермента днк-полимеразы. через 7 лет после опубликования этой идеи, в 1993 г., маллис получил за неё нобелевскую премию. компоненты реакции для проведения пцр в простейшем случае требуются следующие компоненты: днк-матрица, содержащая тот участок днк, который требуется амплифицировать. два праймера, комплементарные противоположным концам разных цепей требуемого фрагмента днк. термостабильная днк-полимераза — фермент, который катализирует реакцию полимеризации днк. полимераза для использования в пцр должна сохранять активность при высокой температуре длительное время, поэтому используют …

2 / 12

екс с олигонуклеотидным праймером. температуру плавления можно приблизительно определить по формуле , где nx — количество нуклеотидов х в праймере. при выборе праймеров желательно придерживаться следующих критериев: gc-состав ~ 40—60 %; близкие tm праймеров (отличия не более, чем на 5 °c); отсутствие неспецифических вторичных структур — шпилек и димеров; желательно, чтобы на 5’-конце был гуанин или цитозин, поскольку они образуют три водородные связи с молекулой матрицы, делая гибридизацию более стабильной. амплификатор ход реакции обычно при проведении пцр выполняется 20—35 циклов, каждый из которых состоит из трёх стадий . денатурация. двухцепочечную днк-матрицу нагревают до 94—96 °c (или до 98 °c, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5—2 мин., чтобы цепи днк разошлись. эта стадия называется денатурацией, так как разрушаются водородные связи между двумя цепями днк. отжиг или ренатурация. когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. эта стадия называется отжигом. температура отжига зависит от состава праймеров и …

3 / 12

асто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. эта стадия длится 7—10 мин. существует много разновидностей пцр применение пцр криминалистика. пцр используют для сравнения так называемых «генетических отпечатков пальцев». необходим образец генетического материала с места преступления — кровь, слюна, сперма, волосы и т. п. его сравнивают с генетическим материалом подозреваемого. достаточно совсем малого количества днк, теоретически — одной копии. днк расщепляют на фрагменты, затем амплифицируют с помощью пцр. фрагменты разделяют с помощью электрофореза днк. полученную картину расположения полос днк и называют генетическим отпечатком пальцев (англ. genetic fingerprint). установление отцовства. хотя «генетические отпечатки пальцев» уникальны (за исключением случая однояйцевых близнецов), родственные связи все же можно установить, сделав несколько таких отпечатков (рис. 3). тот же метод можно применить, слегка модифицировав его, для установления эволюционного родства среди организмов. медицинская диагностика. пцр дает возможность существенно ускорить и облегчить диагностику наследственных и вирусных заболеваний. нужный ген амплифицируют с помощью пцр с использованием …

4 / 12

о пациента определенный цитохром (белок печени, отвечающий за метаболизм чужеродных веществ) может быть более активен, у другого — менее. для того, чтобы определить, какой разновидностью цитохрома обладает данный пациент, предложено проводить пцр-анализ перед применением лекарства.[источник не указан 411 дней] такой анализ называют предварительным генотипированием (англ. prospective genotyping). клонирование генов. клонирование генов (не путать с клонированием организмов) — это процесс выделения генов и, в результате генноинженерных манипуляций, получения большого количества продукта данного гена. пцр используется для того, чтобы амплифицировать ген, который затем вставляется в вектор — фрагмент днк, переносящий чужеродный ген в тот же самый или другой, удобный для выращивания, организм. в качестве векторов используют, например, плазмиды или вирусную днк. вставку генов в чужеродный организм обычно используют для получения продукта этого гена — рнк или, чаще всего, белка. таким образом в промышленных количествах получают многие белки для использования в сельском хозяйстве, медицине и др. секвенирование днк. в методе секвенирования с использованием …

5 / 12

Want to read more?

Download all 12 pages for free via Telegram.

Download full file

About "пцр"

пцр пцр выполнил баев а.ю. история в начале 1970-х годов норвежскому ученому хьеллю клеппе из лаборатории нобелевского лауреата хара гобинды хораны пришла в голову мысль, что можно амплифицировать днк с помощью пары коротких одноцепочечных молекул днк — синтетических праймеров . однако в то время эта идея осталась невостребованной. полимеразная цепная реакция была вновь открыта в 1983 году кэри маллисом. его целью было создание метода, который бы позволил амплифицировать днк в ходе многократных последовательных удвоений исходной молекулы днк с помощью фермента днк-полимеразы. через 7 лет после опубликования этой идеи, в 1993 г., маллис получил за неё нобелевскую премию. компоненты реакции для проведения пцр в простейшем случае требуются следующие компоненты: днк-матрица, содержащая тот уча...

This file contains 12 pages in PPTX format (717.9 KB). To download "пцр", click the Telegram button on the left.

Tags: пцр PPTX 12 pages Free download Telegram